Нан кисломолочный 3: Молочко NAN 3 кисломолочный 400г с 12месяцев

3.2.1. Срыгивание и рефлюкс

В целом отрыгивание можно уменьшить, если кормить маленькими порциями, чаще и позволяя ребенку должным образом отрыгивать воздух во время и после кормления: таким образом можно выпустить проглоченный воздух и газы, образующиеся в желудке.

Что касается лечения рефлюкса, то в настоящее время утолщение содержимого желудка является наиболее часто применяемым диетическим решением. В смесь (или сцеженное грудное молоко) могут быть добавлены различные загустители для увеличения вязкости. Клинически доказано, что они уменьшают рефлюкс и срыгивание у младенцев до шести месяцев [59,60].Загустители, добавленные к ферментированной смеси, применялись в исследовании Роя и соавторов [54]: через 15 дней ферментированная смесь, загущенная кукурузным крахмалом (с высоким содержанием амилопектина), уменьшала частоту и тяжесть срыгивания, отрыжка и икота у 47 детей в возрасте 1–3 мес. Невозможно определить, в какой степени ферментация и присутствие в смеси лактазы способствовали этим эффектам (помимо добавленного загущающего крахмала).

Содержание и состав белка важны для скорости опорожнения желудка: чем больше белка в молоке, тем медленнее его опорожнение.Высокое содержание казеина замедляет эвакуацию из-за образования творога в кислой среде желудка. Скорость опорожнения желудка проверяли путем сцинтиграфической оценки содержимого желудка через 30 и 120 минут после кормления у детей младше 12 месяцев с ( n = 111) или без ( n = 90) жалоб на рефлюкс. Остаточная активность желудка через 30 минут после еды была всего на 5% меньше в группе с жалобами на рефлюкс по сравнению с контрольной группой. Через 120 мин после кормления в обеих группах младенцев, независимо от симптомов рефлюкса, остаточное радиоактивное содержание в желудке составляло 18–22% при кормлении грудным молоком, 25% в случае подкисленной детской смеси («Пеларгон») и составляло 38 % для стандартной формулы [13].Используемые формулы содержали равное количество белка, преимущественно казеина (80%), и имели аналогичную калорийность, осмоляльность и содержание жира, которые, как известно, влияют на скорость опорожнения желудка. Тем не менее, подкисленная смесь, хотя и с преобладанием казеина, показывала опорожнение желудка, аналогичное грудному молоку (с низким содержанием белка и с преобладанием сыворотки), в то время как нормальная смесь с преобладанием казеина имела более низкое опорожнение желудка за 120 минут, чем грудное молоко. Как правило, скорость опорожнения желудка зависела от типа используемого молока, независимо от жалоб на рефлюкс.

Подкисленная детская смесь имеет более высокую скорость опорожнения желудка, чем стандартная смесь, и ее время пребывания в желудке не отличается от грудного молока. В группе рефлюкса опорожнение желудка было немного более быстрым, хотя и сильно варьирующим. Медленную скорость опорожнения желудка следует рассматривать скорее как возможный отягчающий фактор у младенцев с рефлюксом, чем как причинный фактор. Был сделан вывод, что подкисленные смеси могут использоваться в качестве индивидуального лечения отрыгивания на основе скорости опорожнения желудка [13].

3.2.2. Вздутие живота и вздутие живота

В многоцентровом рандомизированном двойном слепом контролируемом исследовании детская смесь, содержащая 50% ферментированной смеси, была исследована в течение двух недель у младенцев в возрасте 0–3 месяцев, страдающих незначительными расстройствами желудочно-кишечного тракта. Уменьшение интенсивности общего пищеварительного дискомфорта было зарегистрировано в обеих исследуемых группах, но уменьшение было значительно больше в группе, получавшей ферментированную смесь [54]. Более конкретно, снижение «газоинтенсивности» (метеоризм) было значительно более выраженным в группе ферментированных смесей; кроме того, «вздутие живота», как правило, было ниже в группе ферментированных смесей.Последний результат (уменьшение вздутия живота) был недавно подтвержден в исследовании с участием недоношенных детей, в котором значительно больше случаев вздутия живота было зарегистрировано в группе, получавшей стандартную смесь, чем в группе, получавшей ферментированную смесь ([55], см. Также ниже). В обоих упомянутых исследованиях для ферментации использовались одни и те же штаммы (, то есть ., Streptococcus thermophilus и Bifidobacterium breve ). Эти штаммы также использовались в исследовании Garcette и Bellaiche [61] по результатам опроса (названного «Серена») по использованию частично ферментированной (15%) смеси у детей младше четырех месяцев.Хотя сообщалось об улучшении общего пищеварительного комфорта у младенцев, страдающих незначительным дискомфортом в желудочно-кишечном тракте, из этого исследования нельзя сделать никаких реальных выводов, поскольку не было контрольной группы и поскольку большинство расстройств желудочно-кишечного тракта у маленьких детей все равно исчезают с возрастом. В целом можно наблюдать положительное влияние ферментированных смесей на дискомфорт при пищеварении.

3.2.3. Диарея

Наиболее изученным эффектом ферментированной детской смеси является ее влияние на диарейные заболевания у младенцев.В нескольких исследованиях [41,56,64,65] изучалось влияние ферментированного молока / смеси у младенцев на профилактику или лечение диарейных заболеваний. Эти исследования показывают, что младенцы могут получить пользу от ферментированных детских смесей во время эпизодов диареи. Thibault [41] изучал влияние смеси, ферментированной Bifidobacterium breve и Streptococcus thermophilus , на частоту острой диареи у здоровых детей в возрасте 4–6 месяцев в рандомизированном двойном слепом контролируемом исследовании.Никакого влияния на частоту диареи не наблюдалось, но повлияло на показатели тяжести: количество случаев обезвоживания, консультации врача и назначение раствора для пероральной регидратации (ПРР) в экспериментальной группе было меньше. В отдельном исследовании на младенцах в раннем отлучении от груди (<5 месяцев) та же ферментированная детская смесь показала, помимо более низкой частоты возникновения, менее тяжелых и более коротких периодов диареи [64].

Профилактический эффект наблюдался у детей младше 12 месяцев (и с низким социально-экономическим статусом), получавших смесь, ферментированную Lactobacillus helveticus и Streptococcus thermophilus [65].Заболеваемость, количество эпизодов и продолжительность эпизодов диареи были ниже в экспериментальной группе по сравнению с контрольной группой. Экспериментальная группа в этом исследовании также показала снижение уровня носительства энтеропатогенов (, т.е. , бактерии, ротавирусы или паразиты).

Кроме того, группу детей с высоким риском атопии кормили негидролизованной ферментированной смесью в течение одного года и регулярно наблюдали до двухлетнего возраста [56]. Ферментированная формула снизила нежелательные явления со стороны желудочно-кишечного тракта на 50% через четыре месяца, тем более за 12 месяцев (39%, vs. 63%), и он, как правило, сохранял эффект ( p = 0,08) через 24 месяца, то есть даже после прекращения кормления смесью. Предполагался рабочий механизм, включающий воздействие на микробиоту кишечника и иммунную систему слизистых оболочек, как предполагалось в более ранних (пре-) клинических исследованиях.

3.2.4. Колики

До сих пор отсутствуют клинические исследования, в которых прямо изучалось влияние ферментированных смесей на профилактику или лечение колик, но в некоторых исследованиях, связанных с непереносимостью лактозы, сообщалось, что ферментированное молоко влияет на время плача у младенцев, страдающих коликами [ 21,22,66].В двух двойных слепых плацебо-контролируемых перекрестных исследованиях смесь предварительно инкубировали с каплями лактазы (дрожжевого происхождения) в течение 24 часов [21] или с каплями лактазы (бактериального происхождения) в течение 4 часов [22] до кормление. Эти два исследования показали значительное сокращение времени плача и / или выделения водорода из дыхания у младенцев с коликами. Тем не менее, небольшой размер выборки этих испытаний ( n = 13 в исследовании Kearney [21] и n = 32 соответствующих включения в исследовании Kanabar [22]) не позволяет делать однозначных выводов, поскольку непереносимость лактозы также может были временными.Более того, в других более ранних исследованиях таких результатов не было: в двойном слепом перекрестном исследовании Миллер [66] сообщил об отсутствии влияния добавленных (дрожжевых) капель лактазы ни на продолжительность плача, ни на выделение водорода из дыхания. у младенцев, находящихся на грудном вскармливании с коликами. Интересно подчеркнуть, что в этом небольшом исследовании Миллера ( n = 15) капли лактазы давались непосредственно ребенку за 5 минут до каждого кормления. Авторы упоминают возможность того, что лактаза (белок) могла быть инактивирована / переварена пептидазами (пепсинами) в желудке.В контексте ферментированного молока отмечается, что бактерии не обязательно должны быть живыми, но неповрежденные клеточные стенки необходимы для защиты активности β-галактозидазы / лактазы во время прохождения через желудок [67].

Колики могут быть связаны с вздутием живота и проблемами из-за газообразования в толстой кишке [20], возможно, из-за нарушенного или неправильного переваривания лактозы, что обычно наблюдается в возрасте до трех месяцев («физиологическая мальабсорбция»). Действительно, у младенцев с коликами было зарегистрировано повышенное выделение водорода из дыхания (свидетельствующее о высокой метаболической активности бактерий), что позволяет предположить, что причиной колик является мальабсорбция лактозы [68].

Хотя два исследования [21,22] предполагают положительный эффект преинкубации лактазы у младенцев с коликами, неясность в отношении этиологии колик сохраняется, и гипотеза мальабсорбции лактозы не может объяснить все случаи колик, наблюдаемых у маленьких детей. Тем не менее, ферментированные смеси могут улучшить пищеварение и усвояемость и, таким образом, быть полезными для младенцев в случаях колик, связанных с непереносимостью лактозы.

Совсем недавно мы опубликовали первые данные клинического испытания, в котором было показано, что ферментированная смесь в сочетании с пребиотическими олигосахаридами снижает частоту колик у младенцев в возрасте четырех недель на 60% [69].

3.2.5. Колонизация и воспаление до родов

Из-за отсутствия доказательств безопасности пробиотиков у недоношенных детей [70] смесь, ферментированная молочнокислыми бактериями (но без живых бактерий в конечном продукте), рассматривалась как альтернатива. вариант в этой уязвимой группе населения [55]. Эффект смеси, ферментированной Bifidobacterium breve и Streptococcus thermophilus , изучали на недоношенных новорожденных (гестационный возраст 30–35 недель).Смесь хорошо переносилась, и после двух недель кормления у недоношенных детей в группе, получавшей ферментированную смесь, наблюдалось снижение распространенности вздутия живота и, вероятно, связанное с этим, имели значительно более низкие уровни кальпротектина в кале, что позволяет предположить, что ферментированная смесь могла способствовать развитию ослабление воспалительной реакции. Состав микробиоты у младенцев, получавших ферментированную смесь, имел более высокое среднее количество Bifidobacteria , log ₁₀ 7,5 по сравнению с log ₁₀ 6.6, чем обычно встречается у доношенных детей. Обогащение бифидобактерий коррелирует с отсроченной колонизацией клостридиальных групп у младенцев, рожденных в гестационном возрасте> 33 недель. Не было показано никакого эффекта кормления на колонизацию Enterobacteria или Bacteroides . На основании положительных эффектов, наблюдаемых в этом исследовании [55], авторы пришли к выводу, что кормление ферментированной смесью может быть частью стратегии минимального энтерального питания для ускорения созревания функции желудочно-кишечного тракта в досрочном периоде.

4. Возможные механизмы действия: как?

Механизмы, с помощью которых ферментированные смеси уменьшают дискомфорт в желудочно-кишечном тракте у младенцев, полностью не изучены. Основные механизмы могут быть связаны с улучшением процесса пищеварения или здоровья пищеварительного тракта, наблюдаемого при употреблении ферментированных смесей. обобщает проблемы ЖКТ и их этиологию, а также то, как ферментированная смесь может повлиять на эти нарушения.

Таблица 2

Проблемы со зрелым желудочно-кишечным трактом, их предполагаемая этиология и потенциальные полезные действия ферментированных детских смесей.

4.1. Лактоза и лактаза

Основным углеводом молока является дисахарид, l-лактоза; грудное молоко содержит около 7 г / дл лактозы. Поскольку молоко является единственным и единственным источником питания для большинства грудных детей млекопитающих и человека, а лактоза обеспечивает около 40% энергии, необходимой новорожденному, правильное переваривание и усвоение лактозы жизненно важны для роста и развития грудного ребенка. С этой целью фермент, лактаза (β-галактозидаза), экспрессируется и присутствует преимущественно в тонкой кишке новорожденного, встроенной в мембрану щеточной каймы энтероцитов, выстилающих его ворсинки.У большинства млекопитающих экспрессия лактазы запрограммирована как временная и исчезает при отъеме, поскольку обычно после этого лактоза будет отсутствовать в рационе [71,72]. Лактаза гидролизует лактозу на составляющие ее (l-аномерные) мономеры, глюкозу и галактозу, оптимально при pH 6 и 25 ° C, которые затем могут абсорбироваться из просвета кишечника.

Аналогичным образом, лактоза также может перевариваться некоторыми бактериальными штаммами (например, бактериями, продуцирующими молочную кислоту), которые экспрессируют фермент лактазу. Инкубация, предпочтительно анаэробная, молока с этими микроорганизмами, i.е. , ферментация, дает ферментированное молоко (продукт) с повышенной кислотностью, так как (часть) лактоза была преобразована бактериями в молочную кислоту [28].

Неполное переваривание лактозы у детей, находящихся на грудном вскармливании, является нормальным и естественным: до 40% лактозы в материнском молоке обычно плохо переваривается [47,73]; Характеристики стула (зеленоватая и ароматная паста) позволяют отличить ребенка, находящегося на грудном вскармливании, от ребенка, вскармливаемого смесью. Непереваренная лактоза в этом случае действует как «пребиотик», но обычно не вызывает побочных эффектов.Однако острая недостаточность переваривания лактозы может привести к проблемам с желудочно-кишечным трактом.

Пониженная или слишком низкая экспрессия лактазы вызывает непереносимость лактозы (гиполактазия) и может привести к проблемам с желудочно-кишечным трактом при проглатывании лактозы: неполностью переваренная лактоза может попасть в толстую кишку и ферментироваться местной микробиотой толстой кишки, приводя к чрезмерному газообразованию (в основном кратковременному). цепные жирные кислоты (SCFA)), что приводит к таким симптомам, как вздутие живота, вздутие живота, метеоризм и / или колики. При ассоциации этих жирных кислот с электролитами, когда они производятся сверх способности поглощения слизистой оболочки, они создают дополнительную осмотическую нагрузку, приводящую к водянистому стулу и диарее.Другими летучими побочными продуктами ферментации лактозы являются метан, водород и диоксид углерода. Большинство из них покидает тело в виде газов. При абсорбции слизистой оболочкой и диффузии в кровоток водород, выдыхаемый через легкие, является косвенным, но обнаруживаемым показателем, используемым для количественной оценки нарушения пищеварения лактозы, хотя для этого теста обычно используются довольно высокие дозы лактозы [47].

Для решения проблем, связанных с перевариванием лактозы, были разработаны смеси для младенцев с низким содержанием или без содержания лактозы.Однако длительное исключение лактозы нецелесообразно, поскольку лактоза является ключевым питательным веществом для младенцев. Помимо того, что лактоза является топливом, она также способствует абсорбции Ca и Mg [82] и является источником галактозы. В начале 1960-х было высказано предположение, что галактоза играет роль в процессе миелинизации во время развития мозга [83]. Однако более свежие отчеты по этой теме отсутствуют.

Другое решение — сохранить лактозу, но обеспечить экзогенную лактазу, которая присутствует в кисломолочных продуктах или кисломолочных смесях.Действительно, было показано, что потребление кисломолочных продуктов значительно облегчает желудочно-кишечные симптомы (боль в животе, диарею, метеоризм), связанные с ферментацией непереваренной лактозы в толстой кишке [68,84,85]. Фермент лактаза, продуцируемый Streptococcus thermophilus или большинство штаммов Lactobacillus bulgaricus во время процесса ферментации противостоят желудочному стрессу, а также постулируется как один из основных двигателей, ответственных за благотворное влияние на здоровье ферментированных смесей для младенцев, особенно в отношении эффекта, наблюдаемого при симптомах, связанных с дистальным отделом. пищеварительный тракт, и.е. , толстая кишка [54].

Непереносимость лактозы менее актуальна для детей раннего возраста, а врожденная недостаточность лактазы встречается крайне редко [73]. Однако, особенно в течение первых двух месяцев жизни, младенцы могут не выделять достаточное количество лактазы для переваривания молока или смеси с высоким содержанием лактозы [73]. Кроме того, во время тяжелой диареи кишечный эпителий может быть поврежден и привести к (вторичной) непереносимости лактозы, поскольку экспрессия лактазы в тонком кишечнике ограничивается ворсинками энтероцитов.Действительно, у 10–20% младенцев в возрасте до двух лет с эпизодами диареи наблюдается непереносимость лактозы, часто в сочетании с аллергией на коровье молоко. Лишь несколько исследований были выполнены в этом отношении у младенцев в возрасте до 4-6 месяцев (когда дается только молоко): осторожное и временное использование безлактозных смесей (или гидролизатов) может быть рассмотрено в тех случаях тяжелых и стойкая диарея [86].

У детей с непереносимостью лактозы и истощением было успешно использовано обезжиренное молоко, ферментированное Lactobacillus bulgaricus и Streptococcus thermophilus , высушенное распылением в определенных температурных условиях для поддержания активности β-галактозидазы.В открытом исследовании лактоза из ферментированного сухого молока, содержащего высокую активность лактазы, прекрасно усваивалась этими детьми, о чем свидетельствуют более низкие баллы водородных респираторных тестов по сравнению с неферментированной детской смесью [74,75]. Обратите внимание, что содержание лактозы в ферментированном продукте, вероятно, было ниже, чем в неферментированной контрольной смеси.

4.2. Опорожнение желудка

По сравнению с молоком, йогурт демонстрирует более медленное опорожнение желудка, что приводит к более регулярному высвобождению питательных веществ в кишечник как у человека [87,88], так и у миниатюрных свиней [89].Наблюдаемая задержка опорожнения желудка от йогурта и кисломолочных продуктов в целом была приписана разнице в консистенции и вязкости между двумя молочными продуктами: как уже давно указывалось, из подкисленного молока получается творог с более тонкой консистенцией по сравнению со сладким молоком [ 45]. Образование творога в желудке в основном связано с осаждением казеина в кислой среде; Точно так же, вероятно, именно казеин отвечает за коагуляцию, наблюдаемую в кисломолочных продуктах.Задержка опорожнения желудка каким-то образом опосредовала улучшенное переваривание лактозы, наблюдаемое с кисломолочными продуктами и, в меньшей степени, с пастеризованными кисломолочными продуктами [88,89,90]. В отличие от этой задержки, скорость опорожнения желудочного сока подкисленной смеси у младенцев была высокой и аналогична грудному молоку, тогда как опорожнение желудка коровьего молока в этом исследовании происходит медленнее, чем опорожнение грудного молока [13]. На первый взгляд противоречивые данные не позволяют сделать общий вывод, и, следовательно, надлежащая оценка роли опорожнения желудка может быть проведена только для конкретных продуктов и целевых групп населения.

4.3. Переваривание белков

Кинетика абсорбции «азотистых соединений», присутствующих в молоке и йогурте, была изучена на человеке и свиньях [88,89], и результаты показали, что белки молока и йогурта легко усваиваются. Несмотря на более медленное опорожнение желудка (см. Предыдущий абзац), оба молочных продукта легко и почти полностью (93%) всасывались. Был сделан вывод, что ферментация не влияет на уровень гидролиза или степень усвояемости. Эндогенная секреция азота (ферменты) была аналогичной, поэтому не наблюдалось различий в физических усилиях, направленных на поглощение диетического белка из любого из молочных источников.

Однако, поскольку незрелый желудочно-кишечный тракт новорожденного не может легко переваривать и адекватно поглощать все макроэлементы, остаточные белки могут попадать в толстую кишку для ферментации местной микробиотой, что приводит к болезненным проблемам с желудочно-кишечным трактом, таким как вздутие живота и вздутие живота. накоплению летучих побочных продуктов этого брожения [91]. Некоторые из этих желудочно-кишечных симптомов, связанных с перевариванием белка, могут быть первыми клиническими проявлениями аллергии и / или атопического заболевания. Следовательно, гипоаллергенная формула, содержащая гидролизованные белки, может быть эффективным лечением.Однако у большинства младенцев с проблемами желудочно-кишечного тракта нет аллергии, и им не нужно избегать интактных белков [4].

В этом случае лучшим решением будет смесь с более легко и полностью усваиваемыми белками. Доклинические данные действительно показывают, что ферментированные смеси обладают более эффективным усвоением белка, чем стандартные смеси [76]. Не влияя на их пищевую ценность, ферментация и возникающее в результате подкисление смеси может сделать белки более доступными для протеолитических ферментов, вероятно, из-за конформационных изменений в четвертичной или трехмерной структуре, как было показано для белков сыворотки [92,93 ].Более того, бактериальная протеолитическая активность, хотя и низкая, которой подвергаются белки во время ферментации, может способствовать этому эффекту.

Гипотеза о том, что ферментация изменяет характеристики белков и облегчает их переваривание, была проверена на трехнедельных поросятах, что ранее показало, что она является действительной моделью для развития и созревания пищеварительного тракта шестимесячных детей грудного возраста [ 94]. Поросятам устанавливали илеостому и кормили неферментированной стандартной детской смесью или смесью, полностью состоящей из продукта (100%).В группе, получавшей 100% ферментированную смесь, перевариваемость белка подвздошной кишки была выше, чем в контроле, и, следовательно, в толстую кишку попадало меньше белка (частично эндогенного) [76,77]. Кроме того, в химусе подвздошной кишки была измерена более низкая общая протеолитическая активность по сравнению с группой, получавшей стандартную формулу: уровни активности трипсина, химотрипсина и эластазы были намного ниже (снижение примерно на 60%). Помимо экономии на секреторной продукции поджелудочной железы таким образом, более низкий уровень люминальных протеаз делает просветную среду менее агрессивной и вредной для энтероцитов, выстилающих кишечник.Протеазы напрямую активируют PAR (рецепторы, активируемые протеазой), что, как было показано у пациентов с СРК, связано с повышенной чувствительностью и восприятием боли и, возможно, запускает воспаление эпителия слизистой оболочки [95,96]. В дополнение к этому было показано, что ферментированные смеси содержат повышенную способность ингибировать протеазу [78]. Сообщалось, что ферментация молочных белков приводит к образованию биоактивных пептидов, среди которых есть ингибиторы протеазы [25], помогающие защитить стенку кишечника.

Что касается предполагаемых конформационных изменений белковой части формулы, не проводилось никаких оценок для сравнения ферментированного и ферментированного. неферментированный продукт в этом отношении. В этой развивающейся и потенциально важной области необходимы дополнительные исследования и разработка инструментов.

4.4. Модуляция кишечной микробиоты

Влияние неперевариваемых олигосахаридов (пребиотиков) и жизнеспособных бактерий (пробиотиков) на кишечную микробиоту широко задокументировано в различных возрастных категориях. Чрезвычайно актуальным, но менее документированным является очень устойчивый эффект ферментированных детских смесей без живых бактерий на кишечную микробиоту.

У здоровых взрослых, которые в течение одной недели получали бесклеточную концентрированную сыворотку из Bifidobacterium breve -ферментированного молока или смеси, ферментированной Bifidobacterium breve и Streptococcus thermophilus , экскреция с фекалиями Bacteroridium fragil. perfringens и клостридиальных спор значительно уменьшается. Количество бифидобактерий увеличилось после употребления бесклеточной концентрированной сыворотки только из ферментированного молока Bifidobacterium breve .Фекальные ферменты также были затронуты в этом исследовании [34]. Несмотря на отсутствие контрольной группы в этом исследовании, что не позволяет сделать однозначный вывод, это исследование показывает, что ферментированный продукт значительно влияет на микробный состав и функции кишечной экосистемы.

С использованием тех же штаммов ферментированная детская смесь была исследована на новорожденных в сравнении со стандартной смесью и грудным молоком. Ферментированная смесь, по-видимому, предотвращает быструю колонизацию Enterobacter cloacae у новорожденных [63,79].Как и у взрослых, авторы сообщают, что ферментированная смесь не препятствует быстрому развитию Bifidobacteria .

Тем не менее, в исследовании Mullié [57] младенцы, которых кормили смесью, ферментированной Bifidobacterium breve и Streptococcus thermophilus , имели более высокую среднюю долю Bifidobacteria в четыре месяца и Bifidobacterium terium longum вагон был выше. В этом исследовании фекалии младенцев в возрасте до четырех месяцев отбирались ежемесячно и анализировались на содержание микробов.Новорожденные, которых кормили ферментированной смесью с рождения, имели более высокую долю фекалий Bifidobacteria , чем младенцы, получавшие стандартную смесь. Более того, виды Bifidobacterium , встречающиеся в группе, получавшей ферментированную смесь, были аналогичны видам, встречающимся у младенцев на грудном вскармливании, и эти виды бактерий были связаны с улучшенным созреванием кишечника и защитной функцией слизистой оболочки. Эта более похожая на грудное молоко колонизация кишечника микробами, вероятно, будет благотворно влиять на иммунную систему развивающегося ребенка и влиять на нее.

В исследовании на недоношенных младенцах не было обнаружено бифидогенного эффекта через две недели смеси, ферментированной Bifidobacterium breve и Streptococcus thermophilus [55]. Был сделан вывод, что низкий уровень Bifidobacterium на исходном уровне, измеренный в этом исследовании, не допускает бифидогенного эффекта молекул пребиотиков.

Изучая pH стула как индикатор метаболической активности кишечных микробов, результат, аналогичный Mullié [57], был обнаружен в исследовании с участием здоровых доношенных детей: pH кала в группе, получавшей ферментированную смесь (5.1) был ниже, чем в группе, получавшей стандартную смесь (5.8), но схож с таковой в контрольной группе грудного вскармливания (5.0), начиная с третьего постнатального дня и далее в течение всех четырех месяцев исследования [58]. Хотя ни ферментированная формула, ни фекальная микробиота не были проанализированы в этом исследовании, авторы предполагают, что «пробиотические продукты ферментации» влияли на процесс микробной колонизации кишечника и были причиной наблюдаемого кислого сдвига рН фекалий. Поскольку в ферментированных смесях нет живых бактерий, а есть только «активные метаболиты», поддерживающие развитие оптимальной микробиоты кишечника, что, в свою очередь, может улучшить иммунные ответы хозяина; авторы также видят интерес к использованию этих смесей у недоношенных детей.

Кроме того, Joosten и Lardeau [80,81] рассмотрели еще одну полезную особенность «активных метаболитов» или «пробиотических продуктов ферментации», присутствующих в ферментированных смесях: они показали, что эти продукты обладают противовоспалительным действием и, следовательно, могут предотвращать распространение патогенов (не менее in vitro ), что снижает подверженность новорожденных этим злокачественным видам бактерий. Благоприятный эффект профилактики диареи, наблюдаемый в предыдущих исследованиях [41,56,64,65], и ее тяжесть могут быть связаны и / или объяснены этими бактериостатическими свойствами.Как уже указывалось выше, основной активный метаболит ферментированных смесей ( т.е. ., Молочная кислота) и кислотность также ограничивают возможность роста бактерий per se . У детенышей кроликов, зараженных Enterobacter cloacae , биологически подкисленной смесью без живых бактерий, наблюдалось снижение частоты желудочной и легочной колонизации по сравнению со стандартной или небиологически подкисленной смесью [97]. На сегодняшний день охарактеризован широкий спектр бактериоцинов (антимикробных пептидов), продуцируемых в процессе ферментации молочнокислыми бактериями и присутствующих в ферментированных молочных продуктах.Однако их (протеолитическое) разложение во время последующей обработки молока может ограничить их полезную антимикробную активность для потребителя при приеме внутрь [25].

5. Выводы

Незначительные проблемы с желудочно-кишечным трактом часто встречаются у младенцев в первые шесть месяцев жизни. Следовательно, для решения этой проблемы может быть рекомендована смесь, специально разработанная для младенцев с легкими проблемами желудочно-кишечного тракта. В качестве альтернативы стандартным смесям были разработаны ферментированные смеси для младенцев без живых бактерий в конечном продукте, но с метаболитами, способствующими укреплению здоровья.Помимо соответствия всем требованиям к питанию, как описано в директиве ЕС, общими особенностями этого лекарства являются несколько более низкое содержание лактозы, присутствие лактазы, более легкоусвояемые белки, неперевариваемые олигосахариды (TOS) и низкий pH (<6). ферментированные формулы.

Важно отметить, что, в отличие от йогуртов, ферментированные смеси подвергаются термообработке и, следовательно, не содержат жизнеспособных бактерий. Клиническая переносимость ферментированных смесей была хорошей и одинаковой у доношенных и недоношенных детей, побочных эффектов не сообщалось.Можно сделать вывод, что эти смеси могут подходить и для недоношенных детей.

Несмотря на их широкое использование в течение многих лет, точный способ действия до сих пор окончательно не выяснен. В этом обзоре дается научное обоснование пользы для здоровья ферментированных смесей в отношении незначительных проблем с желудочно-кишечным трактом, преобладающих у младенцев в возрасте до шести месяцев, независимо от их (возможно, аллергической) этиологии. Мы сосредоточились на общих проблемах желудочно-кишечного тракта, таких как вздутие живота, вздутие живота и срыгивание, и описали конкретные активные соединения и / или характеристики ферментированных смесей, которые могут облегчить / решить эти проблемы на основе общих данных.Мы описали возможные преимущества и основные потенциальные рабочие механизмы.

Все специфические активные соединения и характеристики ферментированного продукта естественным образом генерируются в хорошо описанном и контролируемом процессе ферментации и являются результатом метаболической активности конкретного микроорганизма, используемого для этой цели с древних времен. Ферментацию можно точно контролировать и контролировать, чтобы получить продукты с высокой воспроизводимостью.

Нам пришлось ограничиться характеристиками продукта, известными в настоящее время: в продукте могут присутствовать многие другие (возможно, активные) соединения, пока неизвестные, которые могут возникнуть на стадии ферментации.Определение состава и природы этих соединений является задачей будущего: таким образом процесс ферментации и получаемые из него продукты могут быть еще более целенаправленными и адаптированными с учетом содержания в них функциональных соединений.

Как обсуждалось ранее, кисломолочные продукты обычно считаются легкоусвояемыми. Даже если было проведено множество исследований, например [13,85], для изучения перевариваемости ферментированного молока по сравнению с грудным молоком, все еще остаются неизвестные области.Что касается ферментированных детских смесей, насколько нам известно, никаких клинических исследований, посвященных усвояемости таких смесей у доношенных или недоношенных детей, не проводилось и не публиковалось.

Проблемы с желудочно-кишечным трактом состоят из множества различных симптомов с множеством причин, и их можно лечить разными способами. Поскольку этиология проблем с желудочно-кишечным трактом в основном неизвестна, также трудно выбрать оптимальное решение для питания или лекарственное лечение. Более того, симптомы со стороны желудочно-кишечного тракта часто связаны друг с другом, и, следовательно, сочетание активных ингредиентов и правильных характеристик формулы в одном лечении позволяет устранить более широкий спектр симптомов и может быть наиболее эффективным способом облегчения преобладающих проблем с желудочно-кишечным трактом.Ферментированные детские смеси являются интересным и многообещающим вариантом в этом отношении, и в ближайшем будущем мы с нетерпением ждем данных текущих клинических испытаний для дальнейшего подтверждения целевых преимуществ.

(PDF) Объяснение подкисленных детских смесей

Обзорная статья:

Объяснение подкисленных детских смесей

354 Том 55 No 3S Afr Fam Pract 2013

Введение

Диарея остается одной из основных причин смертности

у младенцев в развивающиеся страны.Два основных фактора, способствующих

диарее младенцев, — это плохие гигиенические условия

и загрязнение детского питания бактериальными патогенами

(Escherichia coli и Salmonella), вирусами (ротавирусами) и

паразитами (Cryptospridium).

1

Грудное молоко остается лучшим

источником питания для младенцев, и

всех матерей следует поощрять к грудному вскармливанию.

2,3

Грудное вскармливание снижает воздействие этих патогенов на

, а также снабжает младенцев

защитными антителами против пищевых патогенов,

, что приводит к снижению заболеваемости диареей у

детей, находящихся на грудном вскармливании.

1

Разработка эффективных методов профилактики

острого гастроэнтерита у младенцев остается центральной задачей

здоровья младенцев. Грудное вскармливание связано с уменьшением на

случаев желудочно-кишечных инфекций, возможно, потому, что

оно способствует росту биодобактерий в кишечном тракте

, в результате чего создание кислой среды является негостеприимной для инфекционных организмов.

4

Несмотря на многочисленные преимущества грудного вскармливания

, это не всегда вариант или возможность

, поскольку многие женщины не могут или предпочитают не кормить грудью

.

5,6

На рынке имеется широкий ассортимент детских смесей

, включая подкисленные детские смеси. Исследование

показывает, что кишечные инфекции уменьшаются у младенцев,

получающих биологически подкисленную детскую смесь.

7,8

Подкисление детской смеси

Подкисление детской смеси осуществляется одним из двух методов

. Формула может быть химически подкислена

путем добавления L — (+) молочной кислоты, или биологически

подкислена посредством ферментации, которая превращает лактозу

в молочную кислоту.Химически подкисленная формула

обеспечивает такую ​​же защиту, как и формула, подкисленная

путем ферментации. Кроме того, попытки изменить микробиоту

в сторону увеличения количества биодобактерий

были достигнуты путем добавления живых биодобактерий

(пробиотики) или биодогенных факторов (пребиотики) к детской смеси

. Было показано, что пробиотики

эффективны в профилактике и лечении диареи у младенцев.

9

На рисунке 1

проводится различие между различными методами подкисления

детских смесей.

Ферментированные молочные продукты могут вызывать различные

желудочно-кишечные, иммунологические и другие эффекты в организме-реципиенте

. Европейское общество педиатров

Гастроэнтерология, гепатология и питание (ESPGHAN)

Комитет по питанию определяет ферментированные смеси для младенцев

и последующие смеси, ферментированные молочнокислыми

кислотообразующими бактериями в процессе производства , но

не содержит значительных количеств жизнеспособных бактерий в конечном продукте

из-за инактивации ферментирующих бактерий

нагреванием или другими способами.Это может включать гомогенизацию

, пастеризацию, стерилизацию и / или распылительную сушку

. Директива Комиссии Европейских сообществ

о детских смесях и последующих смесях разрешает

добавление живых бактерий в детские и / или последующие

смеси с целью подкисления смеси. Ферментированная детская смесь

без живых бактерий обычно не считается

пробиотическим продуктом, исходя из общепринятого определения

пробиотиков как «живых микробных пищевых ингредиентов

, полезных для здоровья».

10

Однако научная основа этого определения была подвергнута сомнению

, поскольку сообщалось, что некоторые пробиотические эффекты

достигаются нежизнеспособными бактериями и даже изолированной

бактериальной ДНК. Таким образом, ферментированная смесь без живых организмов

Подкисленная детская смесь объяснена

Лабушагне ИЛ, бакалавр диетологии, главный диетолог

ван Никерк Э., М. Ломбард MJ, доктор философии, менеджер NICUS, зарегистрированный диетолог

Информационный центр питания, Стелленбошский университет

Для корреспонденции: Мартани Ломбард, электронная почта: nicus @ sun.ac.za

Ключевые слова: детские смеси, кислая детская смесь, ферментированные, пробиотики

Abstract

Разработка эффективных методов профилактики острого гастроэнтерита является важной задачей для здоровья младенцев. Exclusive

Для здоровых младенцев рекомендуется кормление грудью и откладывание прикорма до возраста шести месяцев.

Однако иногда требуется детская смесь. В продаже имеются различные типы. Было обнаружено, что кислая смесь коровьего молока

предотвращает рост патогенных бактерий и сопутствующие диарейные заболевания.

Рецензирование. (Отправлено: 21.01.2013. Принято: 2013-00-00.) © Medpharm S Afr Fam Pract 2012; 55 (3): 354-356

Загружено [Университет Мохагхе Ардебили] в 22:48 26 августа 2015 г.

Питательные вещества | Бесплатный полнотекстовый | Частично ферментированная смесь для младенцев с постбиотиками, включая 3′-GL, специфические олигосахариды, 2′-FL и молочный жир, поддерживает адекватный рост, безопасна и хорошо переносится здоровыми доношенными детьми: двойная слепая, рандомизированная, контролируемая, мульти- Country Trial

MDPI и стиль ACS

Ванденплас, Ю.; de Halleux, V .; Arciszewska, M .; Lach, P .; Похылко, В .; Клименко, В .; Schoen, S .; Abrahamse-Berkeveld, M .; Mulder, K.A .; Porcel Rubio, R .; от имени Исследовательской группы ВОЯЖ. Частично ферментированная смесь для младенцев с постбиотиками, включая 3′-GL, специфические олигосахариды, 2′-FL и молочный жир, поддерживает адекватный рост, безопасна и хорошо переносится здоровыми доношенными детьми: двойная слепая, рандомизированная, контролируемая, мульти- Country Trial. Питательные вещества 2020 , 12 , 3560. https: // doi.org / 10.3390 / nu12113560

Vandenplas Y, de Halleux V, Arciszewska M, Lach P, Pokhylko V, Klymenko V, Schoen S, Abrahamse-Berkeveld M, Mulder KA, Porcel Rubio R, от имени исследовательской группы VOYAGE. Частично ферментированная смесь для младенцев с постбиотиками, включая 3′-GL, специфические олигосахариды, 2′-FL и молочный жир, поддерживает адекватный рост, безопасна и хорошо переносится здоровыми доношенными детьми: двойная слепая, рандомизированная, контролируемая, мульти- Country Trial. Питательные вещества .2020; 12 (11): 3560. https://doi.org/10.3390/nu12113560

Ванденплас, Иван; де Галле, Вирджиния; Арцишевская, Малгожата; Лач, Петр; Похылко, Валерий; Клименко Виктория; Шен, Стефани; Абрахамсе-Беркевельд, Мариеке; Малдер, Келли А .; Porcel Rubio, Росио; от имени Исследовательской группы ВОЯЖ. 2020. «Частично ферментированная смесь для младенцев с постбиотиками, включая 3′-GL, специфические олигосахариды, 2′-FL и молочный жир, поддерживает адекватный рост, безопасна и хорошо переносится здоровыми доношенными детьми: двойная слепая, рандомизированная, контролируемая , Многострановое испытание « Nutrients 12, no.11: 3560. https://doi.org/10.3390/nu12113560

Реферат

Сырое молоко (RM) и полученные из него молочные продукты богаты питательными веществами и микроорганизмами, а их микробный состав был обнаружен в предыдущих исследованиях с помощью традиционных методов, зависящих от культуры и не зависящих от культуры [1,2] .Микробные различия в RM связаны со многими факторами, такими как источники животного происхождения и географическое положение. Во флоре 14 пастбищ ведущими родами бактерий были Enterococcus, Bacillus, Acinetobacter и Lactococcus, но только на нескольких фермах крупного рогатого скота были обнаружены только Staphylococcus aureus и Shigella [3].В ослином молоке было обнаружено, что доминирующими бактериальными типами являются Proteobacteria и Firmicutes с доминирующими родами Pseudomonas, Ralstonia и Acinetobacter [4]. В козьем молоке среди 354 родов доминирующими были протеобактерии и энтеробактерии [5].

Как правило, наиболее доминирующими видами бактерий в молочных продуктах являются лактобациллы, лактококки, стрептококки и лейконостоки Firmicutes, и они влияют на вкус и зрелость молочных продуктов ферментации [6, 7].Например, молочнокислые бактерии играют важную роль в процессе ферментации, в котором они гетерогенно ферментируются с образованием этанола, диоксида углерода, ацетальдегида, ацетона, ацетоина, диацетила и других летучих ароматических соединений, способствуя формированию хорошего вкуса пищи [8]. .Дрожжевые кисломолочные продукты, такие как кефир, кумыс и моцарелла, представляют собой типичные кисломолочные продукты со спиртами, которые вносят важный вклад в аромат и аромат вина [9]. Было обнаружено, что Geotrichum Candidum вносит основной вклад в созревание сыра камамберти и обладает способностью метаболизировать горькие аминопептиды и усиливать вкус серы [10].

Хотя традиционные методы культивирования и молекулярные технологии позволили нам получить предварительное представление о микробном составе молочных продуктов [11,12], полученная информация не всегда точна, а детали микробного разнообразия этих продуктов остаются неуловимыми. Основная причина заключается в том, что большое количество видов микробов не может быть успешно культивировано [13].

В последние годы, с взаимным проникновением генетики, биоинформатики и других дисциплин, все больше и больше бескультурационных технологий стали использоваться в исследованиях микробного разнообразия [14].Метагеномика [15] — это быстрый и эффективный метод, который использует высокопроизводительное секвенирование для одновременного секвенирования миллионов молекул ДНК и конструирует метагеномную библиотеку, обнаруживая последовательности генетического материала вариабельных областей в микроорганизмах, исследуя разнообразие видов микробов и структуру сообщества. . Эта технология позволяет избежать непредсказуемости микробов с низкой численностью культивирования и низкой численности, а также объективно восстанавливает структуру сообщества и соотношение численности, максимизируя развитие микробных ресурсов.Этот подход широко используется в медицине и науке об окружающей среде [16, 17] и постепенно используется в науке о продуктах питания [18].

С помощью метагеномики было обнаружено разнообразие микроорганизмов, доминирующей флоры и метаболического потенциала мексиканского сыра Котия [19]. Это указывает на то, что Lactobacillus, Leuconostoc и Weissella были основной доминирующей флорой, микробная метаболическая активность, связанная с образованием множества вкусовых добавок, в основном была связана с метаболизмом аминокислот с разветвленной цепью и свободных жирных кислот, а также были обнаружены некоторые гены, связанные с производством бактериоцина. и иммунитет.Shewanella, Acinetobacter, Pelomonas, Dysgonomonas, Weissella и Pseudomonas были впервые обнаружены в зернах тибетского кефира [20]. Было обнаружено, что в зернах турецкого кефира сообщества в двух образцах показали высокую стабильность. Lactobacillus, включая L. kefiranofaciens, L. buchneri и L. helveticus, были наиболее многочисленным родом [21]. Разнообразие грибов во французском сыре Tomme d’Orchies было интересным. Результаты показали, что он содержит Yarrowia lipolytica и Galactomyces geotrichum, а также были обнаружены некоторые редкие микроорганизмы, такие как Clavisporalusitaniae, Kazachstania unispora и Cladosporium cladosporioides [22].

Микробное разнообразие ферментированных молочных продуктов, таких как кумыс [23], jueke [24], тараг [25] и айраг [26], было широко исследовано, но было мало сообщений о кисломолочных продуктах в провинции Синьцзян, Китай [27], особенно на юге Синьцзяна. Сайрам Кеттеки (Словакия), традиционная и популярная ферментированная еда ручной работы, была произведена местной уйгурской крестьянкой в ​​провинции Синьцзян в Китае. Для производства СК в качестве сырья используется коровье молоко, а небольшое количество йогурта, оставшееся в предыдущей партии, действует как стартер брожения.Из-за того, что йогурт постоянно производится, закваски для брожения в некоторых семьях даже насчитывают десятилетия. После брожения в фарфоровых недрах при 10-25 ℃ около 6-8 часов, получают продукты молочно-белого цвета, эластичные, кисло-сладкие на вкус с легким содержанием алкоголя. СК был типичным алкогольным кисломолочным продуктом. Несколько исследований изучали молочнокислые бактерии и дрожжи в SK с использованием метода культивирования и молекулярно-биологической идентификации. Сообщалось, что доминирующими штаммами SK были L.Bulgaricus, Streptococcus thermophilus и Saccharomyces cerevisiae [28]. Но некоторые другие исследования показали, что преобладали L. helveticus, Streptococcus thermophilus и Kluyveromycus marxianus [29]. Хотя есть некоторые связанные исследования [30], механизм его образования аромата до сих пор неясен. Несомненно, формирование аромата во многом связано с микроорганизмами, поэтому очень необходимо раскрыть разнообразие микробного сообщества SK и ее сырья.

В текущем исследовании для изучения разнообразия видов микробов и микробного состава в RM и SK были собраны 30 образцов RM и 30 домашнего йогурта, выполнено метагеномное секвенирование.Путем биоинформатического анализа было обнаружено, что микроорганизмы в обоих типах молочных продуктов были разными. Здесь мы сообщаем результаты.

Шестьдесят образцов были собраны в асептических условиях из различных семей национальных меньшинств из города Сайрам округа Байчэн, расположенного на юге Синьцзяна (примерно 41 ° 48 ‘северной широты, 81 ° 87’ восточной долготы). Китай, где в конце июля 2019 года средняя температура составляла 27 ° C. Образцы RM были названы буквой «X» (X1, X2… X34), а образцы SK — буквой «S» (S1, S2… S34). ), соответственно.Каждый образец RM и каждый образец SK были соответствующими, потому что они происходили из одной семьи. Эти собранные образцы хранили при -20 ℃ для дальнейшего использования.

Каждый образец центрифугировали при 10000 об / мин в течение 10 мин. Супернатант отбрасывали, а осадок оставляли. Суммарную микробную ДНК экстрагировали из осадка 500 мг для каждого образца с использованием набора DNeasy Power Soil Kit (QIAGEN, Нидерланды) в соответствии с инструкциями производителя и хранили при -20 ° C перед будущим анализом.Количество и качество экстрагированной ДНК измеряли с помощью спектрофотометра NanoDrop ND-1000 и электрофореза в 0,8% агарозном геле.

Бактериальный V3-V4 гена 16SrRNA был амплифицирован, использованные праймеры были следующими: 338F: 5′-ACT CCT ACG GGA GGC AGCA-3 ‘(вперед) и 806R: 5’ -GGA CTA CHV GGG TWT CTA AT-3 ‘(реверс). Для анализа грибкового сообщества ген внутреннего транскрибируемого спейсера (ITS) амплифицировали с использованием праймеров: ITS5F: 5’-GGA AGT AAA AGT CGT AAC AAG G-3 ‘(вперед) и ITS1R: 5’-GCT GCG TTC TTC ATC GAT GC-3 ‘(реверс).В экспериментах ПЦР термоциклирование состояло из начальной денатурации при 98 ° C в течение 5 минут, 25 циклов денатурации при 98 ° C в течение 30 секунд, отжига при 52 ° C в течение 30 секунд и удлинения при 72 ° C в течение 1 мин с последующим окончательным удлинением при 72 ° C в течение 5 мин.

ПЦР-продуктов измеряли с помощью электрофореза в 2% агарозном геле, и целевые фрагменты собирали с использованием набора для выделения геля (AXYGEN, Далянь, Китай). Что касается предварительных количественных результатов электрофореза, полученные продукты были количественно определены с помощью флуоресценции и в соответствии с количественными результатами и требованиями к объему секвенирования для каждого образца.Затем каждый образец смешивали в соответствующей пропорции и проводили секвенирование парных концов 2 × 300 п.н. с использованием платформы Illumina MiSeq с набором реагентов MiSeq Reagent Kit v3 от Shanghai Personal Biotechnology Co., Ltd (Шанхай, Китай).

Чтобы выполнить требования последующих анализов, все показания были проверены и отфильтрованы с использованием программного обеспечения Quantitative Insights into Microbial Ecology (QIIME) (V1.8.0) [31]. Вкратце, необработанные считывания с точным соответствием штрих-кодам были присвоены соответствующим образцам и идентифицированы как действительные последовательности.Последовательности низкого качества, которые были менее 150 п.н., средние значения Phred менее 20, неоднозначны и содержали мононуклеотидные повторы более 8 п.н., отбрасывали. Чтения с парным концом были собраны с использованием FLASH [32]. После обнаружения химер оставшиеся высококачественные последовательности были сгруппированы в рабочие таксономические единицы (OTU) с 97% идентичностью последовательностей с помощью UCLUST [33]. Наивысшая последовательность была принята в качестве репрезентативной последовательности OTU. Таксономическая классификация OTU была проведена с помощью поиска BLAST и сопоставления последовательностей прокариот с базой данных Greengenes [34] и последовательностей эукариот с базой данных Unite [35].В соответствии с количеством последовательностей, включенных в каждую выборку каждой OTU, был построен файл матрицы численности OTU в каждой выборке.

Анализ данных последовательностей в основном проводился с использованием пакетов QIIME и R (V3.2.0). Индексы альфа-разнообразия на уровне OTU, такие как индекс богатства Chao1 и ACE, индекс разнообразия Шеннона и Симпсона, были рассчитаны с использованием таблицы OTU в QIIME. Кривые ранжированной численности на уровне OTU были сгенерированы для сравнения богатства и равномерности OTU среди выборок.Анализ бета-разнообразия был проведен для изучения структурных вариаций микробных сообществ в образцах, визуализированных с помощью анализа главных компонентов (PCA). Состав таксономии и численность визуализировали с помощью GraPhlAn [36], а корреляции с | RHO | > 0,6 и P <0,01 были визуализированы как сеть совместной встречаемости с помощью Cytoscape. Микробные функции были предсказаны PICRUSt (Филогенетическое исследование сообществ путем реконструкции ненаблюдаемых состояний) [37].

После фильтрации мы получили 4 092 576 высококачественных считываний бактерий в диапазоне от 60 078 до 75 419 со средним значением 68 210 ± 4393 считывания последовательностей на образец. Между тем, для сообщества грибов было создано 4 056 820 считываний последовательностей ITS в диапазоне от 60 253 до 75 925 со средним значением 67 614 ± 4665 считываний последовательностей на образец. Число уникальных и поддающихся классификации репрезентативных последовательностей OTU для бактерий и грибов составляло 2221 и 4062 соответственно.

16SrRNA бактерий из SK имела наибольшее количество последовательностей, за ней следовало количество последовательностей ITS грибов из RM и 16S рРНК бактерий из RM, а количество последовательностей ITS грибов из SK было наименьшим (таблица 1) . По индексу Chao1 наибольшая численность бактерий была в образцах RM, за ней следовали бактерии SK, грибы RM, а наименьшая численность была у грибов SK. По индексу Шеннона наибольшее разнообразие было у грибов RM, за ними следовали бактерии RM и грибы SK, а бактерии SK имели наименьшее разнообразие.Результаты числа OTUS соответствовали результатам разнообразия, которые указывали на то, что виды грибов в RM были наибольшими, а виды бактерий в SK — наименьшими.