Ремантадин биосинтез: Аптека Ригла – забронировать лекарства в аптеке и забрать самовывозом по низкой цене в Москва г.

Содержание

Биовит — Ремантадин (Remantadin)

Состав

1 таблетка содержит

Действующее вещество:

Римантадина гидрохлорид — 50 мг.

Вспомогательные вещества:

Сахар молочный, крахмал картофельный, кислота стеариновая.

Лекарственная форма

Таблетки.

Описание

Плоскоцилиндрические таблетки с фаской, белого цвета и с одной стороны имеет риску.

Фармакотерапевтическая группа

Противовирусный препарат.

Код ATX: J05A С02

Фармакологические свойства

Специфический химиотерапевтический препарат, он оказывает профилактическое действие в отношении гриппозной инфекции, вызванной определенными штаммами вирусов (типа Аз). Ремантадин по сравнению с мидантаном обладает более выраженной противовирусной активностью. Он эффективен в отношении различных вирусов гриппа типа «А», а также вызывает антитоксическое действие при гриппе, вызванном вирусом В.

Подобно мидантану, он неэффективен при других острых респираторных заболеваниях. Противовирусный препарат, производное амантадина. Ремантадин активен в отношении различных штаммов вируса гриппа А (особенно Аг), вирусов клещевого энцефалита (центрально-европейского и российского весенне-летнего), которые принадлежат к группе Арбовирусов семейства Flaviviridae. Основной механизм противовирусного действия — ингибирование ранней стадии специфической репродукции после проникновения вируса в клетку и до начальной транскрипции РНК. Фармакологическая эффективность препарата обеспечивается при ингибировании репродукции вируса в начальной стадии инфекционного процесса.

Основной механизм противовирусного действия — ингибирование ранней стадии специфической репродукции после проникновения вируса в клетку и до начально транскрипции РНК. Фармакологическая эффективность препарата обеспечивается при ингибировании репродукции вируса в начальной стадии инфекционного процесса.

Фармакокинетика

Ремантадин медленно абсорбируется из ЖКТ. Большая часть препарата интенсивно метаболизируется. Период полувыведения из плазмы крови составляет 24-36 ч. Выводится с мочой: менее 15% дозы — в неизменном виде, около 20% — в виде гидроксильных метаболитов. При почечной недостаточности период полувыведения увеличивается приблизительно в 2 раза.

Показания к применению

Раннее лечение и профилактика гриппа в период эпидемий.

Противопоказания

Острые заболевания печени и почек, беременность, тиреотоксикоз. Гиперчувствительность, детский возраст (до 1 года).

С осторожностью: эпилепсия (в т. ч. в анамнезе), тяжелая ХПН, печеночная недостаточность.

Дозы и способ применения

Принимают внутрь (после еды), запивая водой, по следующей схеме: взрослым дают в 1-й день заболевания 0,1 г (2 таблетки) 3 раза; во 2-й и 3-й дни — 2 раза, в 4-й день — 1 раз. В 1- й день заболевания можно принять препарат однократно в дозе 0,3 г (6 таблеток).

Детям от 7 до 10 лет назначают по 0,05 г (1 таблетке) 2 раза в день; 11-14 лет — 3 раза в день. Принимают в течение 5 дней.

Для профилактики гриппа назначают по 0,05 г 1 раз в сутки ежедневно в течение 10-15 дней в зависимости от очага инфекции.

Для профилактики клещевого энцефалита вирусной этиологии взрослым Ремантадин назначают по 100 мг 2 раза/сут. с 12-часовым интервалом в течение 3 дней. В отдельных случаях по назначению врача — 5 дней. Профилактику ремантадином начинают сразу после укуса клеща, но не позднее 48 часов! Группам риска (лица, живущие или находящиеся в лесной местности) допустима профилактика клещевого энцефалита на срок до 15 дней. Побочные эффекты

Ремантадин обычно хорошо переносится. В отдельных случаях возможны болевые ощущения в желудке, метеоризм, повышение уровня билирубина в крови; головная боль, бессонница, нервозность, головокружение, нарушение концентрации внимания.

Особые указания

Применение у новорожденных и грудных детей может привести к развитию гемолитической желтухи. В связи с угнетением жизнедеятельности кишечной палочки уменьшается синтез витаминов комплекса «В» в кишечнике. При применении ремантадина возможно обострение хронических сопутствующих заболеваний. У пациентов пожилого возраста с артериальной гипертонией повышается риск развития геморрагического инсульта. У пациентов с указаниями в анамнезе на эпилепсию и проводившуюся противосудорожную терапию, на фоне лечения ремантадином повышается риск развития эпилептического припадка. В таких случаях ремантадин рекомендуется назначать в дозе до 100 мг/сут одновременно с противосудорожными средствами. При гриппе, вызванном вирусом типа «В», препарат оказывает антитоксическое действие.

Лекарственное взаимодействие

При одновременном применении ремантадина с:

  • парацетамолом и ацетилсалициловой кислотой — уменьшение эффективности ремантадина;
  • циметидином — снижение клиренса ремантадина на 18%.

Форма выпуска и упаковка

Таблетки по 0,05 г (50 мг).

По 10 таблеток в контурной ячейковой упаковке.

По 2 контурных ячейковых упаковок вместе с инструкцией по применению или листком вкладышем помещают в пачку из картона.

Условия хранения

Хранить в сухом, защищенном от света месте, при температуре не выше 25°С.

Хранить в недоступном для детей месте!

Срок годности:

3 года.

Условия отпуска из аптек

Без рецепта врача.

Что лучше: Ингавирин, Амиксин или Ремантадин?

Все препараты от ОРВИ, в том числе и от гриппа делятся на три основные группы. Первая – это вакцины. Ко второй относятся истинные противовирусные препараты, которые уничтожают сам вирус. Третья группа – это средства стимулирующие защитные свойства организма. Именно в эту группу входят наиболее популярные препараты, такие как Ингавирин, Амиксин и Ремантадин.

Механизм действия

В основном средства, стимулирующие защитные свойства организма влияют на иммунную систему, заставляя её быстрее синтезировать вещества, которые борются с вирусом.

Однако реализуется этот механизм у всех препаратов по-разному.

Некоторые из них в дополнении к основному действию обладают способностью блокировать проникновение вируса в здоровые клетки, а также оказывают противовоспалительное действие.

Ремантадин

Одно из первых противовирусных средств, которое было получено еще в 1963 году. Активен в основном в отношении гриппа типа A. Механизм действия основан на блокировании способности вирусной клетки передавать свой геном и тем самым производить новые вирусные частицы.

После того как вирусная частичка проникнет в клетку вокруг неё образуется особая оболочка – эндосома. Она помогает вирусу достичь ядра клетки и передать ему всю генетическую информацию.

Изменяя pH эндосом, Ремантадин препятствует передачи генома, новый вирус не образуется, а старый со временем погибает. Пимом этого препарат препятствует выходу вирусных частиц из уже пораженных клеток и тем самым мешает их дальнейшему распространению.

В аптеках можно увидеть два препарата со схожим названием: Римантадин и Ремантадин. На самом деле и тот и другой содержат одно действующее вещество – ремантадина гидрохлорид. Разницы по действию между ним нет.

Ингавирин

Так же как и Ремантадин препятствует образованию новых вирусных частиц. Правда, действует не на эндосомы, а на сам механизм репродукции, блокируя его фазы. Однако это не единственное действие Ингавирина.

Дополнительно он влияет на выработку интерферона. Именно интерферон делает клетки организма невосприимчивыми к разрушительному действию вируса. При заболевании с высокой, 38 – 38,5 С, температурой, достаточное количество интерферона вырабатывается примерно на третий день болезни.

Если же простуда протекает без температуры, то этот процесс может растянуться на неделю. Ингавирин ускоряет выработку интерферона и тем самым сокращает время необходимое на выздоровление.

Помимо этого, препарат повышает активность цитотоксических лимфоцитов – особых клеток, которые способны уничтожать вирусные частицы. Также он оказывает противовоспалительное действие, подавляя выработку воспалительных цитокинов.

Амиксин


Этот препарат содержит в своем составе вещество – тиролон. Действует он в основном так же, как и Ингавирин, то есть стимулирует в организме синтез собственного интерферона. В ответ на попадание в организм тиролона особые клетки, которые находятся в эпителии кишечника и печени, начинают вырабатывать интерферон.

Влияет Амиксин и на процесс воспроизводства новых вирусных частиц. Попадая внутрь клетки, он блокирует транспорт особых вируспецифичных белков, без которых производство новых частиц просто невозможно.

Помимо этого, он действует на клетки костного мозга и усиливает в них образование антител, которые тоже помогают в борьбе с вирусом. Благодаря такому механизму действия препарат эффективен при различных типах вируса гриппа. Помогает он и при других респираторных инфекциях, некоторых видах вирусах гепатита и вируса герпеса.

Показания и противопоказания

У всех трех препаратов основное показание к применению общее, а именно лечение или профилактика заболеваний которые вызывает вирус гриппа или же другие респираторные вирусные инфекций. Что же касается противопоказаний, то больше всего их у Ремантадина.

Его не стоит применять при:

  • Острых или хронических заболеваниях печени и почек.
  • При тиреотоксикозе.
  • При непереносимости лактозы или при дефиците лактазы.

Ингавирин также противопоказан при непереносимости лактозы и все три препарата нельзя назначать при беременности и во время лактации.

Несмотря на то, что все препараты применяются при ОРВИ и гриппе эффективность их различается. Амикисин эффективен при трех типах гриппа A, B и C, в то время как Ингавирин активен в отношении вирусов A и B, а Ремантадин только в отношении вируса A.

Что лучше?

Что лучше Ингавирин или Ремантадин? Или все-таки Амиксин? Какой препарат будет максимально эффективным, зависит от многих факторов. У каждого из этих трех лекарственных средств есть свои преимущества и недостатки:

  • Амиксин отличается более широкими показаниями. Помимо ОРВИ его можно применять при вирусном энцефаломиелите, а также в составе комплексной терапии хламидиоза, герпеса и при туберкулезе.
  • Амиксин можно назначать детям начиная с 7 лет, тогда как Ингавирин разрешен только с 13, а Ремантадин – с 14 лет.
  • Ремантадин является хорошим профилактическим средством при ОРВИ, а также он способен помочь при клещевом вирусном энцефалите.
  • Ингавирин удобен в применении. В отличие от Ремантадина и Амиксина которые нужно пить по строгим схемам с постепенным изменением дозы в зависимости от дня лечения, его нужно применять один раз в день.
  • Ремантадин не рекомендуется пожилым людям, у которых он может спровоцировать развитие геморрагического инсульта.

Ингавирин, Ремантадин или Амиксин могут назначаться как самостоятельные препараты и как дополнительные средства при лечении заболеваний, например, в сочетании с антибиотиками. Но не следует сочетать эти препараты с другими противовирусными.

Какой именно препарат выбрать будет зависеть не только от возраста пациента и от того, болеет он гриппом или же обычной простудой. В первую очередь на него будет влиять наличие или отсутствие хронических заболеваний, возраст пациента и его индивидуальные реакции на препараты. В любом случае, прежде чем покупать лекарство, лучше проконсультироваться с врачом.

Facebook

Twitter

Вконтакте

Google+


Ремантадин (Remantadin): описание, рецепт, инструкция

Remantadin

Аналоги (дженерики, синонимы)

Действующее вещество

Римантадин (Rimantadinum)

Фармакологическая группа

Противовирусные (за исключением ВИЧ) средства

Рецепт

Международный:

Rp.: Tab. Remantadini 0.05 N. 20.
D. S. Назначается в первый день по 2 таблетки 3 раза в день; в последующие дни по 2 таблетки в день (4 дня).

Россия:

Rp.: Tab. Rimantadini 0.05 № 20. 

D. S. первый день по 2 таблетки 3 раза в день; в последующие дни по 2 таблетки в день 

Отпускается без рецепта

 

Фармакологическое действие

Ремантадин — противовирусный препарат, производное амантадина, или медантана, применяемого как антипаркинсоническое средство, и являющегося вместе с тем специфическим химиотерапевтическим препаратом с противовирусной активностью.

Ремантадин активен в отношении различных штаммов вируса гриппа А (особенно А2), активен в отношении вирусов клещевого энцефалита (центрально-европейского и российского весенне-летнего), которые принадлежат к группе Арбовирусов семейства Flaviviridae.

Основной механизм противовирусного действия — ингибирование ранней стадии специфической репродукции после проникновения вируса в клетку и до начальной транскрипции РНК. Фармакологическая эффективность препарата обеспечивается при ингибировании репродукции вируса в начальной стадии инфекционного процесса.

Фармакодинамика

Данных по этому разделу нет. В текущий момент мы обрабатываем информацию, пожалуйста вернитесь позже.

Фармакокинетика

Данных по этому разделу нет. В текущий момент мы обрабатываем информацию, пожалуйста вернитесь позже.

Способ применения

Для взрослых:

Внутрь, после еды, запивая водой.

Лечение гриппа: взрослым — в 1 день — 300 мг/сут за 1-3 приема; во 2 и 3 дни — 100 мг 2 раза в сутки; в 4 и 5 дни — 100 мг 1 раз в сутки; детям 7-10 лет — 50 мг 2 раза в сутки, 11-14 лет — 50 мг 3 раза в сутки, в течение 5 дней.

Профилактика гриппа: взрослым — 50 мг 1 раз в сутки, в течение 30 дней.

Профилактика клещевого энцефалита: не позднее 48 ч после укуса клеща — 100 мг 2 раза в сутки, с интервалом 12 ч, в течение 3-5 дней; группам риска (лица, живущие или находящиеся в лесной местности) — 100 мг 2 раза в сутки в течение 15 дней.

Лечение острой герпетической инфекции: 100 мг/сут за 1 прием в течение 3 дней; профилактика обострений — 100 мг 1 раз в 3 дня.

Пациентам с эпилепсией и противосудорожной терапией в анамнезе назначают в максимальной суточной дозе 100 мг/сут (при одновременном назначении противосудорожной терапии из-за риска развития эпилептического припадка). У пожилых людей и при ХПН доза должна быть снижена.

Показания

— раннее лечение и профилактика гриппа у взрослых и детей старше 7 лет;
— профилактика гриппа в период эпидемий у взрослых;
— профилактика клещевого энцефалита вирусной этиологии.

Противопоказания

— острые заболевания печени;
— острые и хронические заболевания почек;
— тиреотоксикоз;
— беременность;
— повышенная чувствительность к препарату.

Особые указания

Данных по этому разделу нет. В текущий момент мы обрабатываем информацию, пожалуйста вернитесь позже.

Побочные действия

— Со стороны органов желудочно-кишечного тракта: диарея, диспепсия;
— Со стороны кожных покровов: сыпь;
— Со стороны нервной системы: сонливость, нарушения внимания, атаксия, ажитация, нарушения походки по типу раскачивания, гиперкинезы, депрессия;
— Со стороны органа слуха: шум в ушах;
— Со стороны дыхательной системы: охриплость голоса.

Если появляются другие побочные действия, об этом следует уведомить врача.

Передозировка

Данных по этому разделу нет. В текущий момент мы обрабатываем информацию, пожалуйста вернитесь позже.

Лекарственное взаимодействие

Данных по этому разделу нет. В текущий момент мы обрабатываем информацию, пожалуйста вернитесь позже.

Форма выпуска

Таблетки по 50/100 мг ремантадина белого цвета.

Произошла ошибка при настройке пользовательского файла cookie

Этот сайт использует файлы cookie для повышения производительности. Если ваш браузер не принимает файлы cookie, вы не можете просматривать этот сайт.


Настройка браузера на прием файлов cookie

Существует множество причин, по которым файл cookie не может быть установлен правильно. Ниже приведены наиболее распространенные причины:

  • В вашем браузере отключены файлы cookie. Вам необходимо сбросить настройки браузера, чтобы принять файлы cookie, или спросить вас, хотите ли вы принимать файлы cookie.
  • Ваш браузер спрашивает, хотите ли вы принимать файлы cookie, и вы отказались. Чтобы принять файлы cookie с этого сайта, нажмите кнопку «Назад» и примите файл cookie.
  • Ваш браузер не поддерживает файлы cookie. Попробуйте другой браузер, если вы подозреваете это.
  • Дата на вашем компьютере в прошлом. Если часы вашего компьютера показывают дату до 1 января 1970 г., браузер автоматически забудет файл cookie. Чтобы это исправить, установите правильное время и дату на своем компьютере.
  • Вы установили приложение, которое отслеживает или блокирует установку файлов cookie. Вы должны отключить приложение при входе в систему или проконсультироваться с системным администратором.

Почему этому сайту требуются файлы cookie?

Этот сайт использует файлы cookie для повышения производительности, запоминая, что вы вошли в систему, когда переходите со страницы на страницу. Предоставить доступ без файлов cookie потребует от сайта создания нового сеанса для каждой посещаемой вами страницы, что замедляет работу системы до неприемлемого уровня.


Что сохраняется в файле cookie?

Этот сайт не хранит ничего, кроме автоматически сгенерированного идентификатора сеанса в файле cookie; никакая другая информация не фиксируется.

Как правило, в файле cookie может храниться только та информация, которую вы предоставляете, или выбор, который вы делаете при посещении веб-сайта. Например, сайт не может определить ваше имя электронной почты, если вы не решите ввести его. Разрешение веб-сайту создавать файлы cookie не дает этому или любому другому сайту доступ к остальной части вашего компьютера, и только сайт, создавший файл cookie, может его прочитать.

Римантадин — обзор | ScienceDirect Topics

9 Модуляция белок-белковых взаимодействий с участием виропоринов

Помимо влияния их канальной активности, виропорины участвуют во многих белок-белковых взаимодействиях (ИПП), которые поддаются терапевтическому вмешательству, и могут приобретать все большее значение, когда эти взаимодействия должным образом охарактеризованы [см. недавние обзоры Fischer, Li, Mahato, Wang, & Chen, 2014; Фишер и др., 2012; Ниева и Карраско, 2015].

Например, цитоплазматические области AM2 и BM2 важны для правильной сборки вируса и взаимодействия с M1 (Chen, Leser, Jackson, & Lamb, 2008; Imai, Kawasaki, & Odagiri, 2008; Imai, Watanabe, Ninomiya, Obuchi , & Odagiri, 2004; McCown & Pekosz, 2006), что может быть предложено в качестве привлекательной мишени для наркотиков.

Кроме того, p7 ВГС взаимодействует с другими вирусными структурными и неструктурными белками, которые важны для обеспечения сборки и высвобождения вируса (Gentzsch et al., 2013; Хакшенас, Донг, Юарт, Боуден и Гованс, 2007 г .; Питшманн и др., 2006 г.; Сакаи и др., 2003 г.; Yi, Ma, Yates, & Lemon, 2007), а функции, связанные со сборкой капсида и локализацией нескольких вирусных белков, не затрагиваются ни мутациями, инактивирующими каналы, ни лечением Rim (Tedbury et al., 2011; Wozniak et al., 2010), например, перенос основного белка HCV из липидных капель в ER зависит от взаимодействия между p7 и NS2 (Boson, Granio, Bartenschlager, & Cosset, 2011). Следовательно, нарушение таких взаимодействий потребует действия модуляторов ИПП, а не ингибиторов каналов.

Недавно был проведен обзор партнеров по взаимодействию белков E и SH (Torres, Surya, Li, & Liu, 2015). В случае Е-белков CoV уже давно сообщалось, что взаимодействие с М-белком способствует локализации М и образованию вирионов (Corse & Machamer, 2003; Hogue & Machamer, 2008; Ilk, Egelseer, & Sleytr, 2011; Lim & Liu). , 2001; Сиу и др., 2008; Веннема и др., 1996). В недавних сообщениях подчеркивается взаимодействие с белком, связанным с Lin Seven 1 (PALS1) (Teoh et al., 2010) и синтенином через PDZ-домены белков E, что согласуется с изменениями целостности эпителия легких и воспалением, наблюдаемыми во время инфекции CoV. Нарушение этих путей может иметь явные терапевтические последствия, поскольку у пациентов, инфицированных SARS-CoV, это обострившаяся воспалительная реакция, которая приводит к повреждению эпителия и эндотелия, отеку и острому респираторному дистресс-синдрому (Smits et al. , 2010). Примечательно, что несколько других вирусов, например вирус папилломы человека и грипп А, усиливают патогенез за счет белков, содержащих мотивы связывания PDZ (обзор в Javier & Rice, 2011), что позволяет предположить, что это частный случай широко используемой вирусной стратегии. .

Vpu известен своей способностью разрушать CD4-рецептор ВИЧ (Bour & Strebel, 2003), что требует взаимодействия между цитоплазматическими доменами Vpu и CD4 (McNatt, Zang, & Bieniasz, 2013; Singh et al., 2012) и, вероятно, домены ТМ (Do et al., 2013; Magadán & Bonifacino, 2012) двух белков. Это может даже не требовать образования олигомеров и тем более активности канала. Vpu также влияет на высвобождение вируса посредством взаимодействия с индуцированным интерфероном белком тетерином (BST-2) (Miyagi, Andrew, Kao, & Strebe, 2009; Neil, Zang, & Bieniasz, 2008; Skasko et al., 2012; Van Damme et al. ., 2008), индуцируемый интерфероном белок-хозяин, который ингибирует высвобождение многих оболочечных вирусов, прикрепляя вирионы к клеточной поверхности [rev. Strebel, 2014].

В другом случае ранее сообщалось о взаимодействии между SH- и G-белками RSV в инфицированных клетках (Low, Tan, Ng, Tan, & Sugrue, 2008; Rixon, Brown, Murray, & Sugrue, 2005), хотя значение еще не ясно. Недавно сообщалось, что белок 31, ассоциированный с рецептором В-клеток (BAP31), взаимодействует с белком SH (Li et al., 2015). Хотя об этом взаимодействии не сообщалось в инфицированных клетках, оно может предотвращать расщепление BAP31 и образование проапоптотического фрагмента p20, тем самым задерживая апоптоз инфицированных клеток.Взаимодействие с BAP31 также наблюдалось в виропорине E5 из вирусов папилломы человека высокого риска HPV-16 и HPV-31, где, как считается, он также регулирует апоптоз (Regan & Laimins, 2008).

Агнопротеин JCV взаимодействует с рядом клеточных и вирусных белков (Gerits & Moens, 2012; Gerits et al., 2015). Однако, несмотря на все эти интенсивные исследования, точная регуляторная функция агнопротеина в репликации вируса до конца не изучена. Агнопротеин JCV специфически взаимодействует с адапторным белковым комплексом 3 через свою дельта-субъединицу.Это взаимодействие прерывает везикулярный транспорт, опосредованный комплексом адапторного белка 3. Затем белок не направляется на путь лизосомальной деградации, позволяя транспортировать агнопротеин к плазматической мембране. Полученные данные свидетельствуют о том, что виропорины других вирусов также могут сильно регулироваться за счет специфических взаимодействий с белками клетки-хозяина (Suzuki et al., 2013).

Эти патологически значимые взаимодействия между виропоринами и ассоциированными с ними вирусными белками и белками-хозяевами представляют собой привлекательную терапевтическую мишень для разрушения малыми молекулами, а также пептидами, стабилизированными внутренней ковалентной связью (сшитые пептиды) (Walensky & Bird, 2014).В принципе, как трансмембранные, так и экстрамембранные домены виропоринов могут быть потенциальными матрицами для модуляторов на основе пептидов. Например, можно разработать сшитый пептид, имитирующий α-спиральный цитоплазматический домен белка SH, чтобы нарушить взаимодействие между SH и вариантом эффекторного домена смерти (vDED) BAP31, что приведет к усилению апоптоза и гибели клеток. инфицированные клетки. Можно также имитировать трансмембранный домен для нарушения взаимодействий мономер-мономер, как это недавно было показано для Halobacterium salinarum , где отток небольшого белка с множественной лекарственной устойчивостью ингибировался пептидами, нацеленными на его ТМ-домен (Bellmann-Sickert, Stone, Poulsen, & Deber, 2014).В случае виропоринов нарушение олигомерного статуса отменяет активность канала, классическая стратегия, пересмотренная с другим подходом. Тем не менее, прежде чем эти концептуальные стратегии можно будет широко использовать, должна быть доступна более подробная механистическая информация.

Противовирусные препараты — Знание @ AMBOSS

Последнее обновление: 18 марта 2022 г.

Резюме

Противовирусные препараты — это класс препаратов, используемых для лечения вирусных инфекций. Большинство вирусных инфекций проходят спонтанно у иммунокомпетентных лиц.Целью противовирусной терапии является минимизация симптомов и инфекционности, а также сокращение продолжительности болезни. Эти препараты действуют, останавливая цикл репликации вируса на различных стадиях. В настоящее время противовирусная терапия доступна только для ограниченного числа инфекций. Большинство имеющихся в настоящее время противовирусных препаратов используются для лечения инфекций, вызванных ВИЧ, вирусами герпеса, вирусами гепатита В и С и вирусами гриппа А и В. Поскольку вирусы являются облигатными внутриклеточными паразитами, трудно найти лекарственные мишени, которые препятствуют репликации вируса, не нанося при этом вреда клеткам-хозяевам.В отличие от других противомикробных препаратов противовирусные препараты не дезактивируют и не уничтожают микроб (в данном случае вирус), а действуют путем ингибирования репликации. Таким образом, они предотвращают увеличение вирусной нагрузки до уровня, при котором она может вызвать патогенез, позволяя врожденным иммунным механизмам организма нейтрализовать вирус. В этой статье представлен обзор наиболее часто используемых противовирусных средств. Для получения дополнительной информации об антиретровирусных препаратах, используемых при лечении ВИЧ, известной как высокоактивная антиретровирусная терапия (ВААРТ), см. «Обзор антиретровирусных препаратов для лечения ВИЧ».

Обзор

Антивиралы против гепатита B и C

антивирусные против герпес Вирусы

Системное лечение цитомегаловирусного ретинита у пациентов с ослабленным иммунитетом (например,г., больные СПИДом)
  • CMV профилактика в трансплантации получателей
  • 6
  • 9
  • 6
  • 8
  • Обзор антивиралов против герпесвирусов [3] [4]
    агенты Механизм Действие Показания Побочные эффекты Механизм противовирусного сопротивления

    ACYCLOVIR

    ValacyClovir

    Penciclovir

    Famciclovir

    • Аналог гуанозина (аналог нуклеозида)
    • HSV/VZV-кодируемая тимидинкиназа монофосфорилирует аналог гуанозина в активное промежуточное соединение → фосфорилирование клеточными киназами → ацикловиртрифосфат (ACV-TP)
    • Фосфорилированное лекарственное средство включается в реплицирующуюся цепь вирусной ДНК → ингибирование вирусной ДНК-полимеразы посредством обрыва цепи
    • Избирательное действие только на инфицированные клетки с минимальным воздействием на клетки-хозяева → меньше побочных эффектов

    Ганцикловир

    Валганцикловир

  • 6
  • Foscarnet
    • Нефротоксичность
    • Симптомы желудочно-кишечного тракта (например, Nausea)
    • CNS
    • Гематологические аномалии

    Цидофовир

    Fomivirsen

    противовирусных препаратов против вирусов гриппа

    Ссылки

    1. Ланье Э.Р., Фостер С., Брандейдж Т. и др.Анализ мутаций в гене, кодирующем ДНК-полимеразу цитомегаловируса, в фазе 2 клинических испытаний профилактики бринцидофовиром. J Заразить Dis . 2016; 214 (1): стр. 32-35. дои: 10.1093/infdis/jiw073 . | Открыть в режиме чтения QxMD
    2. Причард МН. Функция киназы UL97 цитомегаловируса человека при вирусной инфекции и ее ингибирование марибавиром. Rev Med Virol . 2009 г.; 19 (4): стр. 215-229. doi: 10.1002/rmv.615. | Открыть в режиме чтения QxMD
    3. He Z, He YS, Kim Y и др.Белок UL97 цитомегаловируса человека представляет собой протеинкиназу, которая аутофосфорилирует серины и треонины. J Virol . 1997 год; 71 (1): стр. 405-11.
    4. Руководство по ВГС: рекомендации по тестированию, ведению и лечению гепатита С. https://web.archive.org/web/202201136/https://www.hcvguidelines.org/sites/default/files/full-guidance-pdf/AASLD-IDSA_HCVGuidance_October_05_2021.pdf . Обновлено: 27 августа 2020 г.Доступ: 3 декабря 2020 г.
    5. Катцунг Б., Тревор А. Базовая и клиническая фармакология . Макгроу-Хилл Образование ; 2014
    6. Актуально. Римантадин: информация о препарате. В: Post TW, изд. Обновление . Уолтем, Массачусетс: UpToDate. https://www.uptodate.com/contents/rimantadine-drug-information?source=preview&search=Rimantadine&anchor=F216956#F216956 .. Дата обращения: 21 февраля 2017 г.
    7. Занамивир. https://www.drugs.com/ppa/zanamivir.html . . Доступ: 21 февраля 2017 г.
    8. Стивер Г. Лечение гриппа противовирусными препаратами. CMAJ . 2003 г.; 168 (1): стр. 49-57.

    Противовирусные препараты, активные в отношении вирусов гриппа А

    Перед лицом постоянной угрозы заражения человека гриппом А (h4N2, h2N1) и В, вспышек птичьего гриппа (H5N1) в Юго-Восточной Азии и возможности возникновения нового человеческий или птичий грипп Вариант развязывания пандемии, вызывает большую озабоченность нехватка как количества, так и поставок эффективных противогриппозных препаратов 1,2,3,4 .В принципе, существует два механизма возникновения пандемического гриппа: во-первых, путем прямой передачи (возможно, мутировавшего вируса) от животного (птицы) к человеку, как это произошло в 1918 г. с «испанским гриппом» (h2N1) 5 ; или, во-вторых, путем рекомбинации вируса птичьего гриппа с вирусом человеческого гриппа, как это произошло в 1957 г. с «азиатским гриппом» (h3N2) и снова в 1968 г. с «гонконгским гриппом» (h4N2) 6,7 (Рисунок 1).

    Рисунок 1: Два механизма возникновения пандемического гриппа.

    В 1918 году вирус «испанского гриппа» h2N1, тесно связанный с птичьим вирусом, приспособился к эффективной репликации в организме человека. В 1957 и 1968 годах события реассортации привели, соответственно, к вирусу «азиатского гриппа» h3N2 и вирусу «гонконгского гриппа» h4N2. Вирус азиатского гриппа h3N2 приобрел три генетических сегмента от вида птиц (ген гемагглютинина (H), нейраминидазы (N) и полимеразы (PB1)). Вирус «гонконгского гриппа» h4N2 приобрел два генетических сегмента от вида птиц (H и PB1).Будущие пандемические штаммы могут возникать посредством любого механизма. Рисунок адаптирован с разрешения из Ref. 7 © (2005) Массачусетское медицинское общество.

    О том, может ли новая пандемия гриппа возникнуть в результате антигенного «дрейфа» вируса птичьего гриппа или антигенного «сдвига» в результате рекомбинации вируса птичьего и человеческого гриппа, можно только догадываться. Однако, хотя этот вопрос имеет решающее значение для будущей разработки вакцины, он имеет гораздо меньшее значение для разработки противовирусных препаратов, поскольку мишени противовирусных препаратов, показанные на рис.2 и другие, которые будут обсуждаться здесь, должны относиться ко всем вариантам вируса гриппа А 8 . В этой статье я сосредоточусь на агентах, для которых было показано, что они обладают активностью против вирусов гриппа А, и рассмотрю их терапевтический потенциал.

    Рисунок 2: Ингибирование цикла репликации вируса гриппа антивирусными агентами.

    После связывания с рецепторами сиаловой кислоты вирионы гриппа интернализуются посредством рецептор-опосредованного эндоцитоза. Низкий рН в эндосоме запускает слияние вирусной и эндосомальной мембран, а приток ионов Н + через канал М2 высвобождает гены вирусной РНК в цитоплазме.Производные адамантана(амина)e блокируют эту стадию снятия покрытия. Репликация и транскрипция РНК происходят в ядре. Этот процесс может быть заблокирован ингибиторами инозин-5′-монофосфатной (ИМФ) дегидрогеназы (клеточного фермента) или вирусной РНК-полимеразы. Стабильность вирусной мРНК и ее трансляцию в вирусный белок можно предотвратить с помощью малых интерферирующих РНК (миРНК). Упаковка и почкование вирионов происходят на цитоплазматической мембране. Ингибиторы нейраминидазы (N) блокируют высвобождение новообразованных вирионов из инфицированных клеток.Рисунок адаптирован с разрешения Ref. 8 © (2004) Macmillan Magazines Ltd. H, гемагглютинин.

    Производные адамантана(амина)е

    Первым синтетическим соединением, ингибирующим репликацию вируса гриппа, был амантадин 9 . Как показано на рис. 2, амантадин блокирует миграцию ионов H + внутрь вирусных частиц (вирионов) внутри эндосом, процесс, который необходим для того, чтобы произошло снятие оболочки.Ионы H + импортируются по каналам M2 (матрица 2) 10 ; трансмембранный домен белка М2 с аминокислотными остатками, обращенными к ионопроводящей поре, показан на рис. 3а (ссылка 11). Было постулировано, что амантадин блокирует внутренний канал внутри тетрамерного пучка спирали M2 12 .

    Рисунок 3: Производные адамантана(амина)е как противовирусные препараты.

    и | Производные амантадина, римантадина и адамантанамина имеют несколько общих структурных особенностей, которые связаны с их механизмом действия: блокада канала M2, который отвечает за транспорт ионов H + (протонов) внутрь вирионов и инициирование процесса снятия оболочки вируса. (Рисунок.2). На рисунке показана модель предполагаемого трансмембранного домена белка М2 с видом сверху, если смотреть с внеклеточной стороны, и поперечным сечением в плоскости липидного слоя. Указаны остатки, которые были идентифицированы как обращенные к ионопроводящей водной поре. б | Структуры производных адамантана(амина)е амантадина и римантадина, а также различных новых производных адамантанамина: спиро[циклопропан-1,2′-адамантан]-2-амин 16 , спиро[пирролидин-2,2′-адамантан] 16 , спиро[пиперидин-2,2′-адамантан] 17 , 2-(2-адамантил)пиперидин 18 , 3-(2-адамантил)пирролидин 19 , римантадин 6 2-изомеры 902 2-(1-адамантил)пиперидин 21 , 2-(1-адамантил)пирролидин 21 и 2-(1-адамантил)-2-метилпирролидин 22 .Панель и воспроизведена с разрешения Ref. 11 © (2000) Американское общество микробиологии.

    Производные адамантана(амина)е амантадин и римантадин (рис. 3b) уже давно доступны как для профилактики, так и для терапии инфекций, вызванных вирусом гриппа А, но их использование ограничено из-за быстрого появления резистентности к лекарственным препаратам, трансмиссивность лекарственно-устойчивых вирусов и, особенно для амантадина, возникновение побочных эффектов со стороны центральной нервной системы (ЦНС).Эти недостатки ставят под угрозу потенциальную полезность амантадина или римантадина, если они используются в качестве отдельных агентов для лечения инфекций, вызванных вирусом птичьего или человеческого гриппа А.

    В частности, поводом для беспокойства является частота возникновения резистентности к адамантану среди вирусов гриппа A (h4N2), выделенных в США 13 и во всем мире 14 . Более 98% устойчивых к адамантану изолятов, выявленных во всем мире в период с 1995 по 2005 год, содержат одну и ту же замену S31N 14 .Глобальная циркуляция резистентных к адамантану вирусов h4N2 беспрецедентна и, по-видимому, не опосредована продолжающимся избирательным давлением лекарственных средств. Можно утверждать, что если устойчивость существует в относительно однородном штамме h4N2 и если противовирусное использование будет сокращено, чувствительные штаммы могут (повторно) появиться, и адамантаны могут восстановить свою эффективность как против эпидемического, так и против пандемического гриппа 15 .

    В дополнение к амантадину и римантадину различные новые производные адамантана(амина)е показали заметную активность против гриппа А (h3N2 и/или h4N2) 16,17,18,19,20,21,22 (рис.3б). Может ли какое-либо из этих новых производных предложить какие-либо преимущества с точки зрения эффективности, селективности, безопасности или профиля резистентности по сравнению с исходными соединениями амантадином и римантадином, необходимо дополнительно изучить. Кроме того, может оказаться целесообразным дальнейшее изучение противовирусного потенциала других «клеточных» соединений, структурно родственных адамантиловой сущности, таких как бананин 23 . В настоящее время можно только предполагать, могут ли какие-либо из новых производных адамантана(амина)е быть активными против амантадин-резистентных вариантов и эффективными in vivo у людей или соответствующих животных моделей.

    Ингибиторы нейраминидазы

    Вирусный гемагглютинин (Н) необходим для взаимодействия вируса с рецептором, несущим N -ацетилнейраминовую кислоту (НАНА, сиаловая кислота). Затем вирусная нейраминидаза (N) отщепляет NANA от гликопротеина клеточной поверхности по специфической связи: SAα2,3Gal (сиаловая кислота, связанная с галактозой α-2,3-связью) или SAα2,6Gal (сиаловая кислота, связанная с галактозой α-2,3-связью). связь α-2,6 (рис. 4)). Это позволяет вирионам потомства покидать инфицированные клетки и распространяться на другие клетки-хозяева.Таким образом, блокируя высвобождение этих новообразованных вирусных частиц, ингибиторы нейраминидазы должны предотвращать дальнейшее распространение вируса 24,25 (рис. 4). Нейраминидаза также может играть роль в ранней гриппозной инфекции эпителия дыхательных путей человека 26 .

    Рисунок 4: Ингибирование вирусной нейраминидазы.

    и | Нейраминидаза отщепляет сиаловую кислоту (SA, также известную как N -ацетилнейраминовая кислота или NANA) от клеточного рецептора вируса гриппа ( b ), так что новообразованные вирусные частицы могут высвобождаться из клеток.Ингибиторы нейраминидазы, такие как занамивир и осельтамивир (рис. 5), препятствуют высвобождению потомства вирионов гриппа с поверхности инфицированных клеток-хозяев. При этом ингибиторы нейраминидазы предотвращают заражение вирусом новых клеток-хозяев и тем самым останавливают распространение инфекции в дыхательных путях. б | SA связан с галактозой (Gal) связью α2–3 (SAα2–3Gal) или связью α2–6 (SAα2–6Gal). Галактоза связана с N -ацетилглюкозамином (Glc N Ac) через β1-4 связь.Панель и адаптирована с разрешения Ref. 25 © (2005) Массачусетское медицинское общество.

    Вирусы птичьего (H5N1) гриппа и вирусы гриппа человека (h4N2, h2N1), по-видимому, нацелены на разные рецепторы дыхательных путей человека: тогда как вирусы человеческого происхождения преимущественно распознают SAα2,6Gal, расположенные на эпителиальных клетках слизистой оболочки носа, околоносовых пазух, глотки, трахеи и бронхов, птичьи вирусы, по-видимому, преимущественно распознают SAα2,3Gal, расположенную более глубоко в дыхательных путях, в альвеолярной клеточной стенке и соединении между респираторными бронхиолами и альвеолами 27 .Вирус птичьего гриппа (H5N1) может вызывать тяжелое заболевание нижних дыхательных путей (LRT) у людей, поскольку он прикрепляется преимущественно к пневмоцитам II типа, альвеолярным макрофагам и нереснитчатым бронхиолярным клеткам LRT человека 28 . С точки зрения эффективности ингибиторов нейраминидазы теоретически не имеет значения, связана ли NANA через α-2,3 или α-2,6-связь, поскольку ингибиторы нейраминидазы действуют как аналоги переходного состояния 29 NANA , независимо от того, как он связан с предпоследним звеном галактозы.

    Осельтамивир и занамивир . Первыми ингибиторами нейраминидазы, разработанными по принципу «аналога переходного состояния» 29 , были DANA (2-дезокси-2,3-дидегидро- N -ацетилнейраминовая кислота) и FANA (2-дезокси-2,3-дегидро- N -трифторацетилнейраминовая кислота). Они послужили ведущими соединениями для разработки ингибиторов нейраминидазы, которые в настоящее время продаются для лечения (и профилактики) вирусных инфекций гриппа А и В: занамивир (Relenza, 4-гуанидино-Neu5Ac2en, GG167) 30 и осельтамивир (Тамифлю, этиловый эфир GS4071, GS4104, Ro64-0796) 31 (рис.5а). Было обнаружено, что оба соединения являются сильнодействующими ингибиторами (IC 50 ≤ 1 нг мл -1 ) нейраминидазы гриппа для ингибирования репликации вирусов гриппа A и B in vitro и in vivo (мыши, хорьки ), хорошо переноситься и быть как профилактически (значительное сокращение числа больных), так и терапевтически (значительное сокращение продолжительности болезни) эффективными против инфекции вирусами гриппа А и В у людей. Однако принципиальное различие между занамивиром и осельтамивиром заключается в том, что занамивир необходимо вводить ингаляционно (10 мг два раза в день), тогда как осельтамивир можно вводить перорально (75 или 150 мг два раза в день).

    Рисунок 5: Ингибиторы нейраминидазы.

    и | Структуры DANA, FANA, занамивира (4-гуанидино-Neu5Ac2en, GG167), осельтамивира (этиловый эфир GS4071, GS4104, Ro64-0796), перамивира (RWJ-270201), производных циклопентана, производного амида циклопентана и производных пирролидина (A- 192558 и А-315675). б | GS4071 в активном центре нейраминидазы вируса гриппа А. с | Расположение мутаций устойчивости к осельтамивиру (h374Y), показывающих, что тирозин в положении 252 участвует в сети водородных связей в нейраминидазах группы 1 (H5N1 и h2N1) 38 .Панель b воспроизведена с разрешения Ref. 31 © (1997) Американское химическое общество и ссылка. 37 © (2002) Macmillan Magazines Ltd. Panel c воспроизведено с разрешения Ref. 38 © (2006) Macmillan Magazines Ltd.

    Ожидается, что ингибиторы нейраминидазы сократят продолжительность болезни на 1–3 дня, снизят риск передачи вируса бытовым или медицинским работникам, уменьшат количество и тяжесть осложнений (синусит, бронхит, ), чтобы сократить использование антибиотиков и предотвратить сезонную инфекцию, вызванную вирусом гриппа.Как показано, в частности, для осельтамивира, чем раньше введение, тем короче продолжительность лихорадки, тем больше облегчение симптомов и тем быстрее возвращается исходная активность и показатели здоровья 32 . Лечение гриппом осельтамивиром уменьшает осложнения со стороны нижних дыхательных путей, особенно бронхит и пневмонию, одновременно с сокращением использования антибиотиков и потребности в госпитализации 33 . Кроме того, было обнаружено, что постконтактная профилактика с применением осельтамивира в дозе 75 мг один раз в день в течение семи дней защищает тесные контакты инфицированных гриппом лиц от заболевания гриппом и предотвращает его распространение в домохозяйствах 34 .Постконтактная профилактика с помощью осельтамивира может считаться эффективным вариантом предотвращения передачи гриппа в домашнем хозяйстве 35 . Однако следует признать, что осельтамивир менее эффективен против гриппа В, чем против гриппа А, в отношении продолжительности лихорадки и персистенции вируса 36 .

    Было обнаружено, что ингибитор нейраминидазы GS4071 расположен в активном центре нейраминидазы 31,37 (рис. 5b). В настоящее время решены две структуры нейраминидазы вируса гриппа А: первая содержит нейраминидазу N1 H5N1, а вторая содержит нейраминидазу N2, как в h4N2 38 (рис.5в). Ингибиторы нейраминидазы вступают в контакт с аргинином в положении 292 через свою карбоксильную группу и с глутаминовой кислотой в положении 119 через свою группу основного амина (в случае осельтамивира) или гуанидиния (в случае занамивира). Поэтому неудивительно, что в этих позициях могут возникать мутации (R292K, E119G), вызывающие устойчивость как к занамивиру, так и к осельтамивиру 39 . Мутация R292K вызывает высокую устойчивость к осельтамивиру, но только низкую (в 5–30 раз) устойчивость к занамивиру.В комплексном исследовании более 1000 клинических изолятов гриппа, полученных в период с 1996 по 1999 г., не было выявлено признаков естественной резистентности ни к осельтамивиру, ни к занамивиру ни в одном из изолятов 40 . Однако у детей, получавших лечение от гриппа осельтамивиром, Kiso et al . 41 обнаружили мутации нейраминидазы в вирусах девяти пациентов (18%), шесть из которых имели мутации в положении 292 (R292K) и двое в положении 119 (E119V). Вирусы гриппа h4N2, устойчивые к занамивиру, могут с трудом возникать in vivo из-за их плохой жизнеспособности (пониженной приспособленности) 42 .

    Рекомбинантные вирусы, содержащие либо нейраминидазу дикого типа, либо одну аминокислотную замену в остатке 119 (E119V) или 292 (R292K), были созданы в вирусе гриппа A (h4N2) методом обратной генетики: оба мутанта показали пониженную чувствительность к осельтамивиру , а вирус R292K показал перекрестную устойчивость к занамивиру. Мутация R292K была связана с нарушением роста и трансмиссивности вируса (в соответствии с более ранними исследованиями 43,44 ), тогда как рост и трансмиссивность вируса E119V были сопоставимы с таковыми у вируса дикого типа 45 .

    Следует отметить, что вирус гриппа A (h4N2), несущий мутацию R292K в гене нейраминидазы, не передавался хорькам в условиях, в которых вирус дикого типа легко передавался 43 . Однако было обнаружено, что другие мутантные вирусы гриппа A (h4N2), то есть E119V и h374Y, оба вызывают устойчивость к осельтамивиру, легко передаются хорькам, хотя мутантный h374Y требовал в 100 раз более высокую дозу для заражения и передавался медленнее, чем у дикого типа 44 .

    Использование ингибиторов нейраминидазы в терапии и профилактике инфекций, вызванных вирусами гриппа А и В, считается новой «загадкой тысячелетия», и для подготовки к пандемии гриппа было предложено создать запасы занамивира и/или осельтамивира 46 . Также была выдвинута гипотеза, что эти соединения теоретически могут ингибировать вирус, вызвавший пандемию 1918 года 46 . Фактически было показано, что рекомбинантные вирусы, содержащие нейраминидазу 1918 или как нейраминидазу 1918, так и гемагглютинин 1918, эффективно ингибируются как in vitro , так и in vivo (мыши) занамивиром и осельтамивиром, а также рекомбинантный вирус, обладающий 1918 Ионный канал М2 может быть эффективно ингибирован амантадином и римантадином.Это указывает на то, что современные противовирусные стратегии могут быть эффективными в сдерживании вновь появляющегося вируса гриппа 1918 или 1918-подобного (h2N1) 47 .

    Недавно была описана резистентность вируса гриппа A (H5N1) к осельтамивиру вследствие мутации h374Y в гене нейраминидазы 48 : оказался менее патогенным для хорьков, чем родительский штамм, и не проявлял перекрестной устойчивости к занамивиру.Хотя ранее сообщалось о мутации h374Y в нейраминидазе гриппа A (h2N1) 49,50 , ее возникновение при инфекции гриппа A (H5N1) вызвало обеспокоенность, поскольку она была связана со смертью в двух из восьми инфицированных гриппом A (H5N1). пациенты 51 . Однако не установлено, была ли причинно-следственная связь между появлением мутации h374Y и летальным исходом 51 .

    Эффективность осельтамивира при лечении инфекции H5N1 у людей не может быть однозначно доказана из-за его неподтвержденного применения.Однако следует отметить, что было показано, что осельтамивир защищает хорьков от смертельной инфекции гриппа H5N1: лечение осельтамивиром в дозе 5 мг/кг -1 в день в течение 5 дней два раза в день (перорально) приводило к полному подавлению репликации вируса в организме. легких и тонкой кишки на 5-е сутки после заражения и, как следствие, предотвратили смертность 52 . Точно так же осельтамивир доказал свою эффективность при лечении мышей, инфицированных высокопатогенным штаммом гриппа H5N1 A/Vietnam/1203/04, хотя для достижения наиболее благоприятного противовирусного эффекта требовались длительные и более высокие дозы осельтамивира 53 .

    Перамивир и другие производные циклопентана или пирролидина . В то время как осельтамивир может быть описан как производное циклогексенила, существует несколько производных циклопентана и пирролидина, которые были описаны как ингибиторы нейраминидазы: перамивир (RWJ-270201, BCX-1182) 54,55,56 и другие циклопентаны 56,57 и производные циклопентанамида 58 , а также различные производные пирролидина, включая A-192558 (ссылка 59), A-315675 (ссылки 60–62) и другие пирролидины 63 (рис.5а). Кроме того, производные 2,3-дизамещенного тетрагидрофуран-5-карбоновой кислоты описаны как ингибиторы нейраминидазы гриппа, хотя и с меньшей ингибирующей активностью по сравнению с соответствующими аналогами пирролидина 64 .

    Перамивир и А-315675 сохраняют активность в отношении различных устойчивых к занамивиру и осельтамивиру вирусов гриппа А и В 65 . В частности, было обнаружено, что новый устойчивый к осельтамивиру вариант гриппа B, который несет замену D198N в вирусной нейраминидазе, сохраняет чувствительность к перамивиру и A-315675.Кроме того, мутант нейраминидазы E119V, который проявляет в 6000 раз более низкую восприимчивость к осельтамивиру и в 175 раз более низкую восприимчивость к занамивиру, чем вирус дикого типа, сохранил полную восприимчивость к A-315675 (ссылка 66). В совокупности исследования, проведенные с мутантами вируса гриппа A (h4N2) 41,42,43,44,45,65,66 , показывают, что ингибиторы нейраминидазы могут выбирать мутации в нескольких позициях (E119V, R152K, D198N, h374Y и R292K). ), которые лишь частично перекрывают 67 , то есть лишь частично порождают перекрестную резистентность.

    In vivo было обнаружено, что перамивир сильно подавляет инфекцию гриппа A (h2N1) у мышей после однократной внутримышечной инъекции (10 мг кг -1 ). Это приписывалось прочному связыванию перамивира с нейраминидазой 68 . Точно так же однократная внутримышечная/внутривенная инъекция перамивира за час до контакта с вирусом обеспечивала защиту от гриппа A (H5N1) у мышей 69 . Однако при пероральном введении человеку перамивир не обеспечивал надежной защиты от инфекции гриппа А человека, что объяснялось очень низкой пероральной биодоступностью (<5%) перамивира 70 ; поэтому необходимы дальнейшие исследования парентеральных форм перамивира.

    Димерные ингибиторы нейраминидазы . На основе занамивира были синтезированы производные 7-алкилового эфира и производные бициклического эфира, которые показали повышенную активность в отношении уменьшения бляшек вируса гриппа А in vitro 71 и улучшенную эффективность при пероральном приеме in vivo (мыши) 72 соответственно, по сравнению с исходным соединением, занамивиром. Было обнаружено, что димерные производные занамивира со связывающими группами длиной 14-18 атомов являются в 100 раз более сильными ингибиторами репликации вируса гриппа in vitro и in vivo , чем занамивир 73,74 .Эти соединения продемонстрировали длительную противовирусную активность благодаря чрезвычайно длительному времени персистенции в легких, что позволяет применять режим дозирования один раз в неделю. Это открывает перспективы нового типа противогриппозного препарата, который можно было бы вводить в виде однократной дозы при лечении гриппа или один раз в неделю при профилактике инфекции 74 .

    Рибавирин и вирамидин

    Рибавирин уже давно признан противовирусным средством широкого спектра действия с особенно выраженной активностью в отношении ортомиксовирусов (то есть гриппа) и парамиксовирусов (то есть кори и респираторно-синцитиального вируса (РСВ)) 75 .Инфекция RSV является единственной (-) РНК-вирусной инфекцией, для лечения которой официально одобрен аэрозольный рибавирин. Пероральный рибавирин также используется в сочетании с парентеральным пегилированным интерфероном-α для лечения хронической инфекции вируса гепатита С (ВГС). Внутривенная форма рибавирина зарегистрирована для лечения геморрагической лихорадки с почечным синдромом (ГЛПС). Помимо рибавирина, вирамидин, который можно считать амидиновым пролекарством рибавирина (рис. 6), имеет значительный потенциал в качестве противогриппозного препарата 76 .Рибавирин примечателен тем, что не вызывает лекарственной устойчивости, и, насколько мне известно, до сих пор не сообщалось о резистентности репликации вируса гриппа к рибавирину. Очевидно, отсутствие лекарственной устойчивости связано с тем, что основной мишенью противовирусного действия рибавирина является клеточный фермент: инозин-5′-монофосфат (ИМФ) дегидрогеназа (отвечает за превращение ИМП в ксантозин-5′-монофосфат), ключевой фермент, участвующий в биосинтезе ГТФ и синтезе вирусной РНК (рис.6).

    Рисунок 6: Ингибирование IMP-дегидрогеназы.

    Вирамидин действует как пролекарство (предшественник) рибавирина, который внутриклеточно превращается в его 5′-монофосфатное производное, рибавирин-MP. Последний ингибирует инозин-5′-монофосфат (ИМФ) дегидрогеназу, важнейший фермент биосинтеза РНК, в том числе вирусной РНК. IMP-дегидрогеназа отвечает за превращение IMP в ксантозин-5′-монофосфат (XMP), который, в свою очередь, далее превращается в GMP (гуанозин-5′-монофосфат), GDP (гуанозин-5′-дифосфат) и GTP (гуанозин-5′-монофосфат). -трифосфат).Последний служит субстратом вместе с АТФ, УТФ и ЦТФ в синтезе РНК.

    Рибавирин активен против вирусов гриппа человека и птиц (H5N1) в пределах 50% эффективной концентрации (EC 50 ) в диапазоне 6–22 мкМ 76 . Из трех путей (пероральный, аэрозольный и внутривенный), с помощью которых рибавирин можно вводить при лечении гриппа, внутривенный путь является предпочтительным для терапии острой вирусной инфекции гриппа. Пероральный рибавирин не показал ожидаемой клинической или вирусологической эффективности в более ранних исследованиях гриппа A (h2N1) 77 .Аэрозоль с рибавирином успешно применялся (на основании уменьшения выделения вируса и клинических симптомов) для лечения гриппозных инфекций у студентов колледжей 78 . Внутривенное введение рибавирина (со средней концентрацией в плазме 20–60 мкМ) было связано с улучшением симптомов и элиминацией вируса гриппа из носоглоточных мазков и трахеальных аспиратов 79 .

    Внутривенный рибавирин был успешно исследован при лечении лихорадки Ласса 80 и ГЛПС 81 .Оба исследования показали значительные преимущества рибавирина с точки зрения выживаемости и снижения тяжести заболевания. Режим дозирования внутривенного рибавирина состоит из нагрузочной дозы 2 грамма рибавирина с последующим введением 1 грамма каждые 6 часов в течение 4 дней. В течение следующих 5 дней введение поддерживающей дозы 0,5 г каждые 8 ​​часов должно привести к концентрации, необходимой для подавления репликации вируса гриппа (человеческого и птичьего). Дозолимитирующей токсичностью будет гемолитическая анемия, которая должна быть обратимой при прекращении терапии.

    Гибридный белок сиалидазы и сиалилгликополимеры

    Недавно сообщалось о рекомбинантном слитом белке, состоящем из каталитического домена сиалидазы (нейраминидазы), полученного из Actinomyces viscosus , слитого с последовательностью, закрепляющейся на клеточной поверхности, как о новом ингибиторе широкого спектра действия вируса гриппа 82 . Белок слияния сиалидазы следует применять местно в качестве ингалятора для удаления рецепторов вируса гриппа — сиаловых кислот — из эпителия дыхательных путей.Было показано, что слитая конструкция сиалидазы, DAS181 (флудаза), эффективно расщепляет рецепторы сиаловой кислоты, используемые вирусами как человеческого, так и птичьего гриппа. DAS181 продемонстрировал мощную противовирусную и клеточно-защитную эффективность против группы лабораторных штаммов и клинических изолятов гриппа A и гриппа B со значениями ингибирования репликации вируса EC 50 в диапазоне 0,04–0,9 нМ. Значительная in vivo эффективность слитой конструкции сиалидазы была отмечена как в профилактических, так и в терапевтических подходах 82 .

    На рецепторы сиаловой кислоты также могут воздействовать полиакриламидные конъюгаты сиаловой кислоты, также называемые сиалилгликополимерами 83,84 . Сиалилгликополимеры ингибируют прикрепление вируса гриппа к клеткам. In vivo , при введении в форме аэрозоля в течение 24–110 часов после заражения, было обнаружено, что они полностью предотвращают смертность у мышей, инфицированных адаптированными для мышей штаммами гриппа А (h4N2, h2N1). Эти сиалилгликополимеры нацелены на детерминанту рецептора SAα2-6Galβ1-4Glc N Ac, распознаваемую вирусами гриппа А и В человека.Это сделало бы их потенциально ценными для защиты от любых вновь появляющихся (человеческих) штаммов вируса гриппа.

    миРНК и фосфоротиоатные олигонуклеотиды

    Обнаружено, что малые интерферирующие РНК (миРНК), специфичные к консервативным областям генов вируса гриппа, снижают продукцию вируса в легких инфицированных мышей при внутривенном введении миРНК в комплексах с поликатионным носителем до или после инициации вирусной инфекции 85 .Доставка siRNAs, специфичных к высококонсервативным областям нуклеопротеина или кислой полимеразы, значительно снижала титры легочных вирусов у мышей, инфицированных вирусом гриппа A, и защищала животных от летального заражения. Эта защита была специфической и не опосредованной противовирусным интерфероновым ответом. Лечение siRNA, специфичной для гриппа, было в целом эффективным и защищало животных от летального заражения высокопатогенными вирусами птичьего гриппа A подтипов H5 и H7 86 .Можно было предсказать, что определенные миРНК будут эффективны против гриппа, исходя из столь же эффективных результатов, полученных с другими специфическими миРНК против коронавируса SARS (тяжелого острого респираторного синдрома) в сопоставимых ситуациях 87 .

    Фосфоротиоатные олигонуклеотиды (PS-ON) (то есть REP 9, 40-мерный PS-ON) обладают потенциалом при введении в виде аэрозоля для профилактики и лечения гриппозной инфекции 88 . Аналогичным образом, антисмысловые фосфородиамидатные олигомеры морфолино (ARP-PMO) могут быть дополнительно изучены в связи с их потенциалом в лечении инфекций, вызванных вирусом гриппа H5N1 89 .

    Ингибиторы РНК-полимеразы вируса гриппа

    РНК-полимераза вируса гриппа состоит из комплекса трех полипептидов, кодируемых вирусом (PB1, PB2 и PA), которые в дополнение к РНК-репликативной активности также обладают эндонуклеазной активностью, обеспечивающей «снятие кепки» для инициации процесс транскрипции и последующего перевода 90 . Гены полимеразного комплекса способствуют высокой вирулентности человеческого изолята вируса гриппа H5N1 A/Vietnam/1203/04 (Ref.91). Это наблюдение подчеркивает важность новых противовирусных препаратов, нацеленных на полимеразу, для дальнейшего развития терапии и профилактики инфекций, вызванных вирусом человеческого и птичьего гриппа.

    Сообщалось о нескольких соединениях, действующих либо на уровне РНК-реплиазы (РНК-полимеразы), либо на уровне эндонуклеазы. Подобно ингибиторам, которые, как было обнаружено, ингибируют обратную транскриптазу (РНК-зависимую ДНК-полимеразу) ВИЧ или РНК-репликазу (РНК-зависимую РНК-полимеразу) ВГС, ингибиторы РНК-реплиазы гриппа можно разделить на два класса: нуклеозиды и не- нуклеозиды.Примерами ингибиторов нуклеозидного типа являются 2′-дезокси-2′-фторгуанозин (FdG) 92,93 и Т-705 94,95,96 (рис. 7).

    Рисунок 7: Ингибиторы РНК-полимеразы вируса гриппа.

    и | FdG, флутимид, тиадиазоло[2,3-а]пиримидин и пиримидинилацилтиомочевина. б | Предполагаемый способ действия Т-705, по данным Furuta и коллег 96 .

    Т-705 представляет собой замещенный пиразин с мощной противогриппозной активностью in vitro и in vivo .Согласно сравнительному исследованию, Т-705 даже более эффективен, чем осельтамивир, при увеличении множественности инфекции ( in vitro ) или при использовании более высокой противовирусной дозы ( in vivo ) 95 . Было высказано предположение, что Т-705 превращается внутриклеточно в рибонуклеотид Т-705-4-рибофуранозил-5′-монофосфат (Т-705 RMP) с помощью фосфорибозилтрансферазы и при дальнейшем фосфорилировании в его 5′-трифосфат (рис. 7), T-705 RTP затем будет ингибировать РНК-полимеразу вируса гриппа GTP-конкурентным образом 96 .В отличие от рибавирин-5′-монофосфата, Т-705 RMP незначительно ингибирует дегидрогеназу IMP, что указывает на то, что он обязан своей активностью против вируса гриппа главным образом, если не исключительно, ингибированием РНК-полимеразы вируса гриппа.

    В дополнение к РНК-полимеразе активность эндонуклеаз «захвата кэпа» или «очистки кэпа», связанная с комплексом PB1–PB2–PA, может быть привлекательной мишенью для ингибиторов вируса гриппа: ее можно ингибировать 4-замещенными 2 производные ,4-диоксобутановой кислоты 97 и N -гидроксамовая кислота/ N -производные гидроксиимида 98 .Аналогичным образом было показано, что флутимид, 2,6-дикетопиперазин (рис. 7), идентифицированный в экстрактах грибов вида Delitschia confertaspora , специфически ингибирует кэп-зависимую эндонуклеазную активность, связанную с РНК-полимеразой вируса гриппа, и ингибирует репликацию вирусов гриппа А и В в культуре клеток 99 . Как вирусная РНК-полимераза, так и эндонуклеаза должны быть дополнительно изучены в качестве мишеней для разработки противогриппозных агентов.

    Недавно появился новый класс мощных ингибиторов вируса гриппа (EC 50 для репликации вируса: 0.08–0,09 мкМ) 100 , представленный тиадиазоло[2,3-a]пиримидином и пиримидинилацилтиомочевиной (рис. 7). Хотя механизм действия этого класса высокоэффективных и селективных ингибиторов вируса гриппа еще предстоит установить, они представляют собой весьма интересное направление, заслуживающее внимания. Ряд новых тандемных производных бисетероцикла, состоящих из метилоксазола и тиазола, также может служить основой для дальнейшей оптимизации, хотя основные соединения показали лишь умеренную активность против вируса гриппа А 101 .

    Интерферон (индукторы)

    Интерферон был первоначально открыт почти 50 лет назад, индуктором которого был вирус гриппа 102 . На самом деле, Барон и Айзекс ссылались на отсутствие интерферона в легких при смертельных случаях гриппа 103 . В некоторых более ранних исследованиях интерферон, вводимый интраназально, не обеспечивал значительной защиты при профилактике инфекций, вызванных вирусом гриппа А 104,105 .

    С тех пор пегилированный интерферон-α (вводимый парентерально) в сочетании с (пероральным) рибавирином стал стандартной терапией хронических инфекций ВГС. Таким образом, накоплен большой опыт применения этой комбинации 106 , которая может быть легко использована для профилактики и лечения инфекций, вызванных вирусом гриппа человека, а также птичьего гриппа у человека. При профилактике и терапии грипповирусных инфекций продолжительность лечения будет намного короче, чем при лечении гепатита С, что, очевидно, скажется на удобстве (цена/выгода) и побочных эффектах, которые неотъемлемо связаны с применением интерферона. и рибавирин.

    В дополнение к интерферону индукторы интерферона, такие как поли(I)·поли(C), обнаруженные около 40 лет назад 107 , также могут играть роль в борьбе с вирусными инфекциями гриппа. Профилактика с использованием инкапсулированной в липосомы двухцепочечной РНК (поли(I)·поли(С)) обеспечивает полную и длительную защиту от инфекции гриппа А 108 . Кроме того, в сочетании с (интраназальной) вакцинацией поли(I)·поли(C) обеспечивает полную защиту от вируса гриппа, что могло быть опосредовано повышенной экспрессией Toll-подобного рецептора 3 и интерферона-α/β в качестве а также T H 1- и T H 2 родственные цитокины 109 .Неясно, может ли использование экзогенного интерферона или индукция эндогенного интерферона с помощью поли(I), поли(С) или других двухцепочечных РНК помочь в профилактике или терапии инфекций, вызванных вирусом птичьего или человеческого гриппа, но с учетом «Возрождения» интерферона в лечении ВГС-инфекции потенциал интерферона при гриппе, возможно, заслуживает пересмотра.

    Ингибиторы сигнальной трансдукции

    Ингибиторы сигнальной трансдукции, такие как ингибиторы тирозинкиназы ErbB 110 или семейства киназ Abl (т. диссеминация поксвирусов.Точно так же сигнальный каскад можно рассматривать как привлекательную возможность для будущих стратегий по блокированию продукции вируса гриппа. Экспорт рибонуклеопротеина вируса гриппа (RNP) из ядра зависит от клеточного сигнального каскада Raf/MEK/ERK kinase (MAPK) 112 , и эта PKCα-опосредованная активация передачи сигналов ERK специфически запускается накоплением вируса гриппа. -А-вирусный гемагглютинин на клеточной мембране 113 . Таким образом, PKCα-опосредованная активация ERK может рассматриваться как потенциальная мишень для вмешательства в размножение вируса гриппа.

    Другие потенциальные цели

    Недавно сайт связывания CPSF30 на белке NS1A вируса гриппа А был предложен в качестве потенциальной мишени для разработки противовирусных препаратов, направленных против вируса гриппа А 114 . Белок NS1A ингибирует 3′-концевой процессинг клеточных пре-мРНК путем связывания с 30-кДа субъединицей фактора специфичности расщепления и полиаденилирования (CPSF30). Этот сайт связывания также необходим для эффективной репликации вируса.Было обнаружено, что фрагмент CPSF30, названный F2F3, поскольку он охватывает второй и третий домены цинковых пальцев, специфически связывается с сайтом связывания CPSF30: он ингибирует репликацию вируса гриппа А, но не ингибирует 3′-концевой процессинг клеточного пре-мРНК. Это может указывать на то, что CPSF30-связывающий сайт NS1A может быть нацелен на низкомолекулярные ингибиторы репликации ВИЧ 114 .

    Комбинированная терапия

    Комбинированные схемы лечения, используемые для лечения Mycobacterium tuberculosis и ВИЧ-инфекции, дают больший эффект, чем каждое соединение, вводимое по отдельности, снижают вероятность развития лекарственной устойчивости и могут позволить снизить индивидуальные дозы лекарств, тем самым уменьшая побочные эффекты .При терапии (или профилактике) инфекций, вызванных вирусом гриппа, комбинация (пегилированного) интерферона и рибавирина может быть дополнительно дополнена амантадином (или римантадином). Эта комбинация из трех препаратов показала эффективность при лечении хронической инфекции ВГС 115 . Теоретически можно ожидать, что при гриппе такая схема из трех препаратов даст положительный результат. Все три препарата по отдельности активны в отношении репликации вируса гриппа in vitro и действуют по разным механизмам, что означает, что в сочетании они могут оказывать аддитивное или даже синергетическое действие, снижая при этом риск возникновения резистентные варианты вируса.Еще в 1984 году Хайден и др. . 116 указывали на аддитивное синергетическое действие между интерфероном-α2 и римантадином или рибавирином. Точно так же можно рассматривать комбинации (пегилированного) интерферона с ингибиторами нейраминидазы (занамивир, осельтамивир или перамивир), а также комбинации рибавирина (или вирамидина) с ингибиторами нейраминидазы.

    Следует также обратить внимание на комбинации адамантан(аминов) (амантадин или римантадин) с ингибиторами нейраминидазы (занамивир или осельтамивир). In vitro было обнаружено, что римантадин действует синергетически с занамивиром, осельтамивиром или перамивиром, снижая выход внеклеточного вируса гриппа A (h4N2) 117 . In vivo , осельтамивир в дозе 10 мг кг -1 в день и амантадин в дозе 15 мг кг -1 в день обеспечивали аналогичную защиту от риска смерти, связанного с гриппом A (H5N1), у мышей, но когда оба препарата были объединены, они обеспечивал дополнительную защиту от летальности по сравнению с обоими соединениями, назначаемыми в качестве монотерапии химиотерапией 118 .Единственным контролируемым исследованием на людях было сравнение ремантадина отдельно с ремантадином плюс ингаляционный занамивир у госпитализированных (взрослых) пациентов с тяжелым гриппом 119 . Хотя предварительное, это исследование указало на более высокую клиническую пользу от комбинации занамивира с римантадином.

    Выводы

    Доступно несколько препаратов, которые можно использовать по отдельности или в комбинации для лечения (профилактики или терапии) инфекции, вызванной пандемическим вирусом гриппа птиц или человека.К ним относятся производные адамантана(амина)е (амантадин), ингибиторы нейраминидазы (занамивир и осельтамивир), рибавирин и интерферон. В то же время следует активизировать попытки дальнейшего проектирования и разработки новых противовирусных препаратов, основанных на известных молекулярных мишенях, таких как нейраминидаза или процесс снятия оболочки вируса, или на пока еще относительно неисследованных мишенях, таких как вирусная РНК-полимераза. Последние, в принципе, могут быть нацелены как на нуклеозидные, так и на ненуклеозидные типы ингибиторов, подход, который оказался наиболее успешным в случаях обратной транскриптазы ВИЧ и РНК-полимеразы ВГС.

    14.4 Механизм действия других противомикробных препаратов – микробиология

    Цель обучения

    • Объясните различия между механизмами действия препаратов, нацеленных на грибки, простейшие, гельминты и вирусы

    Поскольку грибы, простейшие и гельминты являются эукариотическими, их клетки очень похожи на клетки человека, что затрудняет разработку лекарств с селективной токсичностью. Кроме того, вирусы размножаются в клетках-хозяевах человека, что затрудняет разработку лекарств, избирательно токсичных для вирусов или инфицированных вирусом клеток.Несмотря на эти проблемы, существуют противомикробные препараты, которые нацелены на грибки, простейшие, гельминты и вирусы, а некоторые даже нацелены на более чем один тип микробов. В Таблице 14.7, Таблице 14.8, Таблице 14.9 и Таблице 14.10 приведены примеры противомикробных препаратов этих различных классов.

    Противогрибковые препараты

    Наиболее распространенным механизмом действия противогрибковых препаратов является разрушение клеточной мембраны. Противогрибковые препараты используют небольшие различия между грибами и людьми в биохимических путях синтеза стеролов.Стеролы важны для поддержания надлежащей текучести мембран и, следовательно, для надлежащего функционирования клеточной мембраны. Для большинства грибов преобладающим мембранным стеролом является эргостерол. Поскольку клеточные мембраны человека используют холестерин вместо эргостерола, противогрибковые препараты, воздействующие на синтез эргостерола, избирательно токсичны (рис. 14.13).

    Фигура 14.13 Преобладающим стеролом, обнаруженным в клетках человека, является холестерин, тогда как преобладающим стеролом, обнаруженным в грибах, является эргостерол, что делает эргостерол хорошей мишенью для разработки противогрибковых препаратов.

    Имидазолы представляют собой синтетические фунгициды, нарушающие биосинтез эргостерола; они обычно используются в медицине, а также в сельском хозяйстве, чтобы предохранить семена и собранный урожай от плесени. Примеры включают миконазол, кетоконазол и клотримазол, которые используются для лечения грибковых инфекций кожи, таких как стригущий лишай, в частности, микоз стоп (дерматомикоз стопы), дерматомикоз (зуд спортсмена) и дерматомикоза туловища. Эти инфекции обычно вызываются дерматофитами родов Trichophyton , Epidermophyton и Microsporum .Миконазол также используется преимущественно для лечения вагинальных дрожжевых инфекций, вызванных грибком Candida , а кетоконазол используется для лечения отрубевидного лишая и перхоти, которые оба могут быть вызваны грибком Malassezia .

    Препараты триазола, включая флуконазол, также ингибируют биосинтез эргостерола. Однако их можно вводить перорально или внутривенно для лечения нескольких типов системных дрожжевых инфекций, включая оральный кандидоз и криптококковый менингит, оба из которых распространены у пациентов со СПИДом.Триазолы также проявляют более избирательную токсичность по сравнению с имидазолами и связаны с меньшим количеством побочных эффектов.

    Аллиламины, структурно другой класс синтетических противогрибковых препаратов, ингибируют более раннюю стадию биосинтеза эргостерола. Наиболее часто используемым аллиламином является тербинафин (продается под торговой маркой Ламизил), который используется местно для лечения дерматофитных кожных инфекций, таких как микоз, стригущий лишай и зуд спортсменов. Пероральное лечение тербинафином также используется для лечения грибка ногтей на руках и ногах, но оно может быть связано с редким побочным эффектом гепатотоксичности.

    Полиены представляют собой класс противогрибковых средств, естественным образом продуцируемых некоторыми актиномицетами почвенных бактерий и структурно родственными макролидам. Эти большие липофильные молекулы связываются с эргостеролом в цитоплазматических мембранах грибов, создавая тем самым поры. Общие примеры включают нистатин и амфотерицин B. Нистатин обычно используется для местного лечения дрожжевых инфекций кожи, полости рта и влагалища, но также может использоваться при кишечных грибковых инфекциях. Препарат амфотерицин В используется при системных грибковых инфекциях, таких как аспергиллез, криптококковый менингит, гистоплазмоз, бластомикоз и кандидоз.Амфотерицин В был единственным противогрибковым препаратом, доступным в течение нескольких десятилетий, но его применение связано с некоторыми серьезными побочными эффектами, включая нефротоксичность (токсичность для почек).

    Амфотерицин В часто используется в сочетании с флуцитозином, фторированным аналогом пиримидина, который под действием специфического грибкового фермента превращается в токсичный продукт, препятствующий как репликации ДНК, так и синтезу белка в грибах. Флуцитозин также связан с гепатотоксичностью (токсичностью для печени) и угнетением функции костного мозга.

    Помимо воздействия на эргостерол в клеточных мембранах грибов, существует несколько противогрибковых препаратов, воздействующих на другие структуры грибов (рис. 14.14). Эхинокандины, включая каспофунгин, представляют собой группу природных противогрибковых соединений, которые блокируют синтез β(1→3) глюкана, обнаруженного в клеточных стенках грибов, но не обнаруженного в клетках человека. Этот класс препаратов имеет прозвище «пенициллин против грибков». Каспофунгин используется для лечения аспергиллеза, а также системных дрожжевых инфекций.

    Хотя хитин является лишь незначительным компонентом клеточных стенок грибов, он также отсутствует в клетках человека, что делает его селективной мишенью.Полиоксины и никкомицины представляют собой противогрибковые препараты естественного происхождения, которые нацелены на синтез хитина. Полиоксины используются для борьбы с грибками в сельскохозяйственных целях, а никкомицин Z в настоящее время разрабатывается для применения у людей для лечения дрожжевых инфекций и лихорадки долины (кокцидиоидомикоз), грибкового заболевания, распространенного на юго-западе США.

    Считается, что природный противогрибковый гризеофульвин специфически нарушает деление грибковых клеток, вмешиваясь в микротрубочки, участвующие в формировании веретена деления во время митоза.Это был один из первых противогрибковых препаратов, но его применение связано с гепатотоксичностью. Обычно его вводят перорально для лечения различных типов дерматофитных кожных инфекций, когда другие местные противогрибковые препараты неэффективны.

    Существует несколько препаратов, которые действуют как антиметаболиты против грибковых процессов. Например, атоваквон, представитель класса нафтохинонов, является полусинтетическим антиметаболитом для грибковых и протозойных версий митохондриального цитохрома, важного для транспорта электронов.По структуре является аналогом кофермента Q, с которым конкурирует за связывание электронов. Он особенно полезен для лечения пневмонии Pneumocystis , вызванной Pneumocystis jirovecii . Антибактериальная комбинация сульфаметоксазол-триметоприм также действует как антиметаболит против P. jirovecii .

    В таблице 14.7 показаны различные терапевтические классы противогрибковых препаратов, классифицированные по способу действия, с примерами каждого из них.

    Фигура 14.14 Противогрибковые препараты нацелены на несколько различных клеточных структур. (право на использование: модификация работы Maya and Rike/Wikimedia Commons)

    Распространенные противогрибковые препараты
    Механизм действия Класс наркотиков Специальные препараты Клиническое использование
    Ингибирует синтез эргостерола Имидазолы Миконазол, кетоконазол, клотримазол Грибковые инфекции кожи и вагинальные дрожжевые инфекции
    Триазолы Флуконазол Системные дрожжевые инфекции, стоматит и криптококковый менингит
    Аллиламины Тербинафин Дерматофитные кожные инфекции (эпидермофития стопы, стригущий лишай, каучуковый зуд) и инфекции ногтей рук и ног
    Связывает эргостерол с клеточной мембраной и создает поры, разрушающие мембрану Полиены Нистатин Применяется местно при дрожжевых инфекциях кожи, полости рта и влагалища; также используется при грибковых инфекциях кишечника
    Амфотерицин В Различные системные грибковые инфекции
    Ингибирует синтез клеточной стенки Эхинокандины Каспофунгин Аспергиллез и системные дрожжевые инфекции
    Неприменимо Никкомицин Z Кокцидиоидомикоз (лихорадка долины) и дрожжевые инфекции
    Ингибируют микротрубочки и деление клеток Неприменимо Гризеофульвин Дерматофитные кожные инфекции

    Стол 14.7

    Проверьте свое понимание

    • Каким образом нарушение биосинтеза эргостерола является эффективным механизмом действия противогрибковых препаратов?

    Дело в точке

    Лечение грибковой инфекции легких

    Джек, 48-летний инженер, ВИЧ-инфицирован, но в целом здоров благодаря антиретровирусной терапии (АРТ). Однако после особенно напряженной недели на работе у него поднялась температура и появился сухой кашель. Он предположил, что у него просто простуда или легкий грипп из-за перенапряжения, и не придал этому большого значения.Однако примерно через неделю он начал испытывать усталость, потерю веса и одышку. Он решил посетить своего врача, который обнаружил, что у Джека низкий уровень оксигенации крови. Врач назначил анализ крови, рентген грудной клетки и сбор образца индуцированной мокроты для анализа. Его рентген показал небольшое помутнение и несколько пневматоцеле (тонкостенных воздушных карманов), что указывало на пневмонию Pneumocystis (PCP), тип пневмонии, вызванный грибком Pneumocystis jirovecii .Врач Джека госпитализировал его и прописал Бактрим, комбинацию сульфаметоксазола и триметоприма для внутривенного введения.

    P. jirovecii — это дрожжеподобный гриб с жизненным циклом, сходным с циклом простейших. Таким образом, он классифицировался как простейший до 1980-х годов. Он живет только в легочной ткани инфицированных людей и передается от человека к человеку, при этом многие люди заразились в детстве. Как правило, P. jirovecii вызывает пневмонию только у лиц с ослабленным иммунитетом.Здоровые люди могут переносить грибок в легких без каких-либо симптомов заболевания. ПЦП особенно опасен среди ВИЧ-инфицированных с ослабленной иммунной системой.

    ПЦП обычно лечат пероральным или внутривенным введением Бактрима, но альтернативой являются атоваквон или пентамидин (еще один противопаразитарный препарат). Если не лечить, пневмоцистная пневмония может прогрессировать, приводя к коллапсу легкого и почти 100% смертности. Даже при антимикробной лекарственной терапии PCP по-прежнему является причиной 10% смертей, связанных с ВИЧ.

    Цитологическое исследование мазка из образца мокроты Джека с использованием прямого иммунофлуоресцентного анализа (ПФА) подтвердило наличие P.jirovecii (рис. 14.15). Кроме того, результаты анализов крови Джека показали, что количество лейкоцитов в его крови снизилось, что сделало его более восприимчивым к грибку. Его лечащий врач пересмотрел его схему АРТ и внес коррективы. После нескольких дней госпитализации Джека выписали, чтобы продолжить антимикробную терапию дома. С корректировкой его АРВ-терапии количество CD4 у Джека начало увеличиваться, и он смог вернуться к работе.

    Фигура 14.15 Микроскопическое исследование образца индуцированной мокроты или образца бронхоавеолярного лаважа обычно выявляет организм, как показано здесь.(кредит: модификация работы Центров по контролю и профилактике заболеваний)

    Противопротозойные препараты

    Существует несколько механизмов воздействия антипротозойных препаратов на инфекционных простейших (табл. 14.9). Некоторые из них являются антиметаболитами, такими как атоваквон, прогуанил и артемизинины. Атоваквон, помимо противогрибкового действия, блокирует транспорт электронов у простейших и используется для лечения протозойных инфекций, включая малярию, бабезиоз и токсоплазмоз. Прогуанил — еще один синтетический антиметаболит, который в клетках паразитов перерабатывается в активную форму, ингибирующую синтез фолиевой кислоты простейшими.Он часто используется в сочетании с атоваквоном, и эта комбинация продается как маларон как для лечения, так и для профилактики малярии.

    Артемизинин, противогрибковый препарат растительного происхождения, впервые открытый китайскими учеными в 1970-х годах, весьма эффективен против малярии. Полусинтетические производные артемизинина лучше растворяются в воде, чем натуральная версия, что делает их более биодоступными. Хотя точный механизм действия неясен, артемизинины действуют как пролекарства, которые метаболизируются клетками-мишенями с образованием активных форм кислорода (АФК), которые повреждают клетки-мишени.Из-за роста устойчивости к противомалярийным препаратам артемизинины также широко используются в сочетании с другими противомалярийными соединениями в комбинированной терапии на основе артемизинина (АКТ).

    Несколько антиметаболитов используются для лечения токсоплазмоза, вызванного паразитом Toxoplasma gondii . Синтетический сульфаниламидный препарат сульфадиазин конкурентно ингибирует фермент, вырабатывающий фолиевую кислоту у паразитов, и может использоваться для лечения малярии и токсоплазмоза. Пириметамин является синтетическим препаратом, который ингибирует другой фермент в пути производства фолиевой кислоты и часто используется в сочетании с сульфадоксином (другим сульфаниламидным препаратом) для лечения малярии или в сочетании с сульфадиазином для лечения токсоплазмоза.Побочные эффекты пириметамина включают снижение активности костного мозга, что может вызвать усиление синяков и снижение количества эритроцитов. Когда токсичность вызывает беспокойство, для лечения токсоплазмоза обычно назначают спирамицин, ингибитор синтеза белка макролидов.

    Два класса противопротозойных препаратов нарушают синтез нуклеиновых кислот: нитроимидазолы и хинолины. Нитроимидазолы, в том числе полусинтетический метронидазол, который обсуждался ранее как антибактериальный препарат, и синтетический тинидазол, полезны в борьбе с широким спектром простейших патогенов, таких как Giardia lamblia , Entamoeba histolytica и Trichomonas vaginalis .При введении в эти клетки в среде с низким содержанием кислорода нитроимидазолы активируются и вызывают разрыв цепи ДНК, препятствуя репликации ДНК в клетках-мишенях. К сожалению, метронидазол связан с канцерогенезом (развитием рака) у человека.

    Другим типом синтетического противопротозойного препарата, который долгое время считался специфически влияющим на репликацию ДНК у некоторых патогенов, является пентамидин. Исторически он использовался для лечения африканской сонной болезни (вызванной простейшим Trypanosoma brucei ) и лейшманиоза (вызванного простейшими рода Leishmania ), но также является альтернативным средством для лечения грибка Pneumocystis .Некоторые исследования показывают, что он специфически связывается с ДНК, обнаруженной в кинетопластах (кДНК; длинные митохондриальные структуры, уникальные для трипаносом), что приводит к расщеплению кДНК. Однако ядерная ДНК как паразита, так и хозяина остается неизменной. Он также, по-видимому, связывается с тРНК, ингибируя добавление аминокислот к тРНК, тем самым предотвращая синтез белка. Возможные побочные эффекты применения пентамидина включают дисфункцию поджелудочной железы и повреждение печени.

    Хинолины представляют собой класс синтетических соединений, родственных хинину, которые давно используются против малярии.Считается, что хинолины мешают детоксикации гема, которая необходима паразиту для эффективного расщепления гемоглобина на аминокислоты внутри эритроцитов. Синтетические производные хлорохина, хинакрина (также называемого мепакрином) и мефлохина обычно используются в качестве противомалярийных средств, а хлорохин также используется для лечения амебиаза, обычно вызываемого Entamoeba histolytica . Длительное профилактическое использование хлорохина или мефлохина может привести к серьезным побочным эффектам, включая галлюцинации или проблемы с сердцем.У пациентов с дефицитом глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы развивается тяжелая анемия при лечении хлорохином.

    Распространенные противопротозойные препараты
    Механизм действия Класс наркотиков Специальные препараты Клиническое использование
    Ингибируют транспорт электронов в митохондриях Нафтохинон Атоваквон Малярия, бабезиоз и токсоплазмоз
    Ингибирует синтез фолиевой кислоты Неприменимо Прокванил Комбинированная терапия с атоваквоном для лечения и профилактики малярии
    Сульфонамид Сульфадиазин Малярия и токсоплазмоз
    Неприменимо Пириметамин Комбинированная терапия сульфадоксином (сульфаниламидный препарат) при малярии
    Вызывает вредные активные формы кислорода Неприменимо Артемизинин Комбинированная терапия для лечения малярии
    Ингибирует синтез ДНК Нитроимидазолы Метронидазол, тинидазол Инфекции, вызванные Giardia lamblia, Entamoeba histolytica, и Trichomonas vaginalis
    Неприменимо Пентамидин Африканская сонная болезнь и лейшманиоз
    Ингибирует детоксикацию гема Хинолины Хлорохин Малярия и инфекции E.гистолитика
    Мепакрин, мефлохин Малярия

    Стол 14,8

    Проверьте свое понимание

    • Перечислите два механизма действия противопротозойных препаратов.

    Противогельминтные препараты

    Поскольку гельминты являются многоклеточными эукариотами, как и люди, разработка препаратов с селективной токсичностью против них является чрезвычайно сложной задачей. Несмотря на это, было разработано несколько эффективных классов (таблица 14.9). Синтетические бензимидазолы, такие как мебендазол и альбендазол, связываются с β-тубулином гельминтов, предотвращая образование микротрубочек. Микротрубочки в кишечных клетках червей, по-видимому, особенно страдают, что приводит к снижению поглощения глюкозы. Помимо своей активности против широкого круга гельминтов, бензимидазолы также активны против многих простейших, грибков и вирусов, и их использование для ингибирования митоза и прогрессирования клеточного цикла в раковых клетках находится в стадии изучения. Возможные побочные эффекты их применения включают поражение печени и угнетение костного мозга.

    Авермектины относятся к семейству макролидов, впервые обнаруженных в японском почвенном изоляте Streptomyces avermectinius . Более мощным полусинтетическим производным авермектина является ивермектин, который связывается с глутаматзависимыми хлоридными каналами, характерными для беспозвоночных, включая гельминтов, блокируя передачу нейронов и вызывая голодание, паралич и гибель червей. Ивермектин используется для лечения аскаридозов, в том числе онхоцеркоза (также называемого речной слепотой, вызываемого червем Onchocerca volvulus ) и стронгилоидоза (вызываемого червем Strongyloides stercoralis или S.топливный ). Ивермектин также может лечить паразитических насекомых, таких как клещи, вши и постельные клопы, и не токсичен для человека.

    Никлозамид — это синтетический препарат, который уже более 50 лет используется для лечения инфекций, вызванных ленточными червями. Хотя механизм его действия не совсем ясен, никлозамид, по-видимому, ингибирует образование АТФ в анаэробных условиях и ингибирует окислительное фосфорилирование в митохондриях патогенов-мишеней. Никлозамид не всасывается из желудочно-кишечного тракта, поэтому у пациентов могут достигаться высокие локальные концентрации в кишечнике.Недавно было показано, что он также обладает антибактериальной, противовирусной и противоопухолевой активностью.

    Другим синтетическим противогельминтным препаратом является празиквантел, который используется для лечения паразитических ленточных червей и печеночных трематод и особенно полезен для лечения шистосомоза (вызванного кровяными трематодами из трех родов Schistosoma ). Его механизм действия остается неясным, но, по-видимому, он вызывает приток кальция к червю, что приводит к сильным спазмам и параличу червя.Он часто используется в качестве предпочтительной альтернативы никлозамиду при лечении ленточных червей, когда желудочно-кишечный дискомфорт ограничивает использование никлозамида.

    Тиоксантеноны, еще один класс синтетических препаратов, структурно связанных с хинином, проявляют антишистосомную активность, ингибируя синтез РНК. Тиоксантенонлукантон и его метаболит гикантон были впервые использованы в клинической практике, но серьезные неврологические, желудочно-кишечные, сердечно-сосудистые и печеночные побочные эффекты привели к их прекращению.Оксамнихин, менее токсичное производное гикантона, эффективен только против S. mansoni , одного из трех известных видов, вызывающих шистосомоз у людей. Празиквантел был разработан для воздействия на два других вида шистосом, но опасения по поводу повышения резистентности возобновили интерес к разработке дополнительных производных оксамнихина для воздействия на все три клинически важных вида шистосом.

    Общие противогельминтные препараты
    Механизм действия Класс наркотиков Специальные препараты Клиническое использование
    Ингибируют образование микротрубочек, снижая поглощение глюкозы Бензимидазолы Мебендазол, альбендазол Различные гельминтозы
    Блокирование передачи нейронов, вызывающее паралич и голодание Авермектины Ивермектин Болезни аскарид, включая речную слепоту и стронгилоидоз, и лечение паразитических насекомых
    Ингибировать выработку АТФ Неприменимо Никлозамид Заражение кишечным цепнем
    Вызывает приток кальция Неприменимо Празиквантел Шистосомоз (кровяные сосальщики)
    Ингибирует синтез РНК Тиоксантеноны Лукантон, гикантон, оксамнихин Шистосомоз (кровяные сосальщики)

    Стол 14.9

    Проверьте свое понимание

    • Почему трудно разрабатывать противогельминтные препараты?

    Противовирусные препараты

    В отличие от сложной структуры грибов, простейших и гельминтов, структура вируса проста и состоит из нуклеиновой кислоты, белковой оболочки, вирусных ферментов и, иногда, липидной оболочки. Кроме того, вирусы являются облигатными внутриклеточными патогенами, которые используют клеточный механизм хозяина для репликации. Эти характеристики затрудняют разработку препаратов с селективной токсичностью против вирусов.

    Многие противовирусные препараты являются аналогами нуклеозидов и действуют путем ингибирования биосинтеза нуклеиновых кислот. Например, ацикловир (продается как зовиракс) является синтетическим аналогом нуклеозида гуанозина (рис. 14.16). Он активируется ферментом вируса простого герпеса тимидинкиназой и при добавлении к растущей цепи ДНК во время репликации вызывает обрыв цепи. Его специфичность в отношении инфицированных вирусом клеток обусловлена ​​как потребностью в вирусном ферменте для его активации, так и повышенным сродством активированной формы к вирусной ДНК-полимеразе по сравнению с ДНК-полимеразой клетки-хозяина.Ацикловир и его производные часто используются для лечения инфекций, вызванных вирусом герпеса, включая генитальный герпес, ветряную оспу, опоясывающий лишай, инфекции, вызванные вирусом Эпштейна-Барр, и цитомегаловирусные инфекции. Ацикловир можно вводить местно или системно, в зависимости от инфекции. Одним из возможных побочных эффектов его использования является нефротоксичность. Препарат аденин-арабинозид, продаваемый как видарабин, представляет собой синтетический аналог дезоксиаденозина, механизм действия которого подобен ацикловиру.Он также эффективен для лечения различных вирусов герпеса человека. Однако из-за возможных побочных эффектов, связанных с низким количеством лейкоцитов и нейротоксичностью, в настоящее время предпочтение отдается лечению ацикловиром.

    Рибавирин, другой синтетический аналог гуанозина, работает по механизму действия, который не совсем ясен. По-видимому, он мешает синтезу ДНК и РНК, возможно, за счет уменьшения внутриклеточных пулов гуанозинтрифосфата (ГТФ). Рибаварин также ингибирует РНК-полимеразу вируса гепатита С.Он в основном используется для лечения РНК-вирусов, таких как гепатит С (в комбинированной терапии с интерфероном) и респираторно-синцитиальный вирус. Возможные побочные эффекты применения рибавирина включают анемию и влияние на развитие нерожденных детей у беременных. В последние годы для лечения гепатита С также был разработан другой нуклеотидный аналог, софосбувир (Solvaldi). Софосбувир представляет собой аналог уридина, который препятствует активности вирусной полимеразы. Его обычно назначают одновременно с рибавирином, с интерфероном и без него.

    Ингибирование синтеза нуклеиновых кислот — не единственная цель синтетических противовирусных препаратов. Хотя механизм действия амантадина и родственного ему римантадина не совсем ясен, эти препараты, по-видимому, связываются с трансмембранным белком, который участвует в выходе вируса гриппа из эндосом. Блокирование побега вируса также предотвращает высвобождение вирусной РНК в клетки-хозяева и последующую репликацию вируса. Рост резистентности ограничил использование амантадина и римантадина при лечении гриппа А.Использование амантадина может привести к неврологическим побочным эффектам, но побочные эффекты римантадина кажутся менее серьезными. Интересно, что из-за их воздействия на химические вещества мозга, такие как дофамин и NMDA (N-метил-D-аспартат), амантадин и римантадин также используются для лечения болезни Паркинсона.

    Ингибиторы нейраминидазы, включая олсетамивир (Тамифлю), занамивир (Реленза) и перамивир (Рапиваб), специально нацелены на вирусы гриппа, блокируя активность нейраминидазы вируса гриппа, предотвращая высвобождение вируса из инфицированных клеток.Эти три противовирусных препарата могут уменьшить симптомы гриппа и сократить продолжительность болезни, но они различаются по способам введения: олсетамивир вводят перорально, занамивир вводят ингаляционно, а перамивир вводят внутривенно. Устойчивость к этим ингибиторам нейраминидазы все еще кажется минимальной.

    Плеконарил представляет собой разрабатываемый синтетический противовирусный препарат, который показал себя перспективным для лечения пикорнавирусов. Использование плеконарила для лечения простуды, вызванной риновирусами, не было одобрено FDA в 2002 г. из-за отсутствия доказанной эффективности, отсутствия стабильности и связи с нерегулярными менструациями.Его дальнейшая разработка для этой цели была остановлена ​​в 2007 году. Однако плеконарил все еще исследуется для использования в лечении опасных для жизни осложнений энтеровирусов, таких как менингит и сепсис. Он также исследуется для использования в глобальной ликвидации определенного энтеровируса, полиомиелита. Плеконарил, по-видимому, работает, связываясь с вирусным капсидом и предотвращая обнажение вирусных частиц внутри клеток-хозяев во время вирусной инфекции.

    Вирусы со сложным жизненным циклом, такие как ВИЧ, труднее поддаются лечению.Во-первых, ВИЧ нацелен на CD4-положительные лейкоциты, которые необходимы для нормального иммунного ответа на инфекцию. Во-вторых, ВИЧ является ретровирусом, а это означает, что он преобразует свой РНК-геном в копию ДНК, которая интегрируется в геном клетки-хозяина, скрываясь, таким образом, в ДНК клетки-хозяина. В-третьих, обратной транскриптазе ВИЧ не хватает корректирующей активности, и она вносит мутации, которые способствуют быстрому развитию устойчивости к противовирусным препаратам. Чтобы помочь предотвратить появление резистентности, в АРТ для ВИЧ обычно используется комбинация конкретных синтетических противовирусных препаратов (рис. 14.17).

    Ингибиторы обратной транскриптазы блокируют ранний этап преобразования генома вирусной РНК в ДНК и могут включать конкурентные ингибиторы аналогов нуклеозидов (например, азидотимидин/зидовудин или AZT) и ненуклеозидные неконкурентные ингибиторы (например, этравирин), которые связывают обратную транскриптазу и вызывают инактивирующие конформационные изменения. Лекарства, называемые ингибиторами протеазы (например, ритонавир), блокируют процессинг вирусных белков и предотвращают созревание вируса. Ингибиторы протеазы также разрабатываются для лечения других типов вирусов.Например, симепревир (Olysio) был одобрен для лечения гепатита С и вводится вместе с рибавирином и интерфероном в составе комбинированной терапии. Ингибиторы интегразы (например, ралтегравир) блокируют активность интегразы ВИЧ, ответственной за рекомбинацию копии ДНК вирусного генома в хромосому клетки-хозяина. Дополнительные классы препаратов для лечения ВИЧ включают антагонисты CCR5 и ингибиторы слияния (например, энфувиритид), которые предотвращают связывание ВИЧ с корецептором клетки-хозяина (хемокиновый рецептор типа 5 [CCR5]) и слияние вирусной оболочки с хозяином. клеточной мембраны соответственно.В таблице 14.10 показаны различные терапевтические классы противовирусных препаратов, классифицированные по способу действия, с примерами каждого из них.

    Фигура 14.16 Ацикловир является структурным аналогом гуанозина. Он специфически активируется вирусным ферментом тимидинкиназой, а затем предпочтительно связывается с вирусной ДНК-полимеразой, что приводит к обрыву цепи во время репликации ДНК.

    Фигура 14.17 Антиретровирусная терапия (АРТ) обычно используется для лечения ВИЧ.Здесь показаны мишени используемых в настоящее время классов наркотиков. (кредит: модификация работы Томаса Сплеттстессера)

    Распространенные противовирусные препараты
    Механизм действия Препарат Клиническое использование
    Аналог нуклеозида Ингибирование синтеза нуклеиновой кислоты Ацикловир Инфекции, вызванные вирусом герпеса
    Азидотимидин/зидовудин (AZT) ВИЧ-инфекция
    Рибавирин Инфекции, вызванные вирусом гепатита С и респираторно-синцитиальным вирусом
    Видарабин Инфекции, вызванные вирусом герпеса
    Софосбувир Инфекции, вызванные вирусом гепатита С
    Ненуклеозидное неконкурентное ингибирование Этравирин ВИЧ-инфекция
    Ингибируют выход вируса из эндосом Амантадин, римантадин Инфекции вирусом гриппа
    Ингибирует нейраминадазу Олсетамивир, занамивир, перамивир Инфекции вирусом гриппа
    Ингибирует снятие оболочки вируса Плеконарил Серьезные энтеровирусные инфекции
    Ингибирование протеазы Ритонавир ВИЧ-инфекция
    Симепревир Инфекции, вызванные вирусом гепатита С
    Ингибирование интегразы ралтегравир ВИЧ-инфекция
    Ингибирование слияния мембран Энфувиритид ВИЧ-инфекция

    Стол 14.10

    Проверьте свое понимание

    • Почему ВИЧ трудно лечить противовирусными препаратами?

    Ссылка на обучение

    Чтобы узнать больше о различных классах антиретровирусных препаратов, используемых для АРВТ при ВИЧ-инфекции, ознакомьтесь с каждым из классов препаратов против ВИЧ, предоставляемых Министерством здравоохранения и социальных служб США, на этом веб-сайте.

    Аналоги нуклеотидов — Структура, свойства, использование, синтез, анализ, хранение, лекарственные формы, доза | Синтез и профиль лекарственного средства

    Аналоги нуклеотидов: a.Пуриновые нуклеозиды и нуклеотиды I. Ацикловир (Окувир, Зовиракс, Цикловир) ii. Ганцикловир (Гангард) б. Ингибиторы пиримидиновых нуклеозидов и нуклеотидов iii. Идоксуридин (Антизона, Дендрид) в/в. Метисазон (Марборан) d. Адамантанамины 1. Амантадин (Симметрел) 2. Римантадин Разное i. Рибавирин (виразол)

    Противовирусные препараты — Синтез и профиль препарата
    Аналоги нуклеотидов

    а.Пуриновые нуклеозиды и нуклеотиды

     

    я. Ацикловир ( Окувир, Зовиракс, Цикловир)


    Синтез


    Метаболизм: Биодоступность ацикловира составляет 15–30 %. метаболизируется до 9-карбоксиметоксиметилгуанина, который неактивен.

    Свойства и применение: Ацикловир представляет собой белый кристаллический порошок, мало растворим в воде, растворим в диметилсульфоксиде и в разбавленных минеральных кислоты и гидроксиды щелочных металлов и очень мало растворимы в этаноле.Это аналог пуринового нуклеозида, используемый в качестве противовирусного средства против вирусов герпеса.

    Анализ: Растворить образец в безводной уксусной кислоте и титровать 0,1 М хлорная кислота. Определите конечную точку потенциометрически. Выполните пустое титрование.

    Доза: При инфекциях, вызванных вирусом герпеса, вводимая доза для больным с ослабленным иммунитетом — до 10 мг/кг массы тела каждые 8 ​​ч.

    Лекарственные формы: Ацикловир крем B.П., Ацикловир глазная мазь Б.П., Ацикловир внутривенные инфузии БП, ацикловир суспензия для приема внутрь БП, ацикловир таблетки B.P., Диспергируемые таблетки ацикловира B.P.

    Метаболизм валацикловира: Родственный аналог 6-дезоксиацикловира представляет собой пролекарственная форма ацикловира, которая активируется за счет метаболизма ксантином оксидаза.

    Метаболизм цидофовира: Метаболизируется путем фосфорилирования и дает цидофовира дифосфат.

    Метаболизм фамцикловира: Это пролекарство пенцикловира, которое образуется in vivo путем гидролиза ацетильных групп и окисления по 6-му положению оксидаза со смешанной функцией. Пенцикловир и его метаболит пенцикловира трифосфат обладает противовирусной активностью.


    Метаболизм видарабина: Быстро дезаминируется ферментом аденозиндезаминазой, который присутствует в сыворотке и красных кровяных тельцах.Фермент превращает видарабина в его основной метаболит арабинозилгипоксантин, обладающий слабым противовирусная активность.


    Применение: Используется для кратковременного лечения простого герпеса и ветряная оспа, вызванная вирусом ветряной оспы (VZV).

     

    ii. Ганцикловир (Гангард)


    Синтез


    Свойства и применение: Ганцикловир представляет собой белый порошок, растворимый в воде. и он используется в качестве противовирусного агента.

    Доза: Рекомендуемая доза составляет 5 мг/кг 1 ч для инфузии каждые 12 ч в течение 14 дней.

     

    б. Ингибиторы пиримидиновых нуклеозидов и нуклеотидов

     

    iii. Идоксуридин (Антизона, Дендрид )


    Синтез


    Метаболизм: Период полувыведения из плазмы составляет 30 минут, быстро метаболизируется в крови до идоксурацила и урацила.

    Свойства и применение: Идоксуридин представляет собой белый кристаллический порошок, мало растворим в воде и спирте. Растворяется в разбавленных растворах гидроксиды щелочных металлов. Является аналогом пиримидинового нуклеозида и используется в качестве противовирусное средство против вируса герпеса.

    Анализ: Растворить образец в диметилформамиде и оттитровать 0,1 М гидроксид тетрабутиламмония. Определите конечную точку потенциометрически.

    Доза: Местно вводимая доза в виде мази равна 0.5%, 4–16 раз в сутки или по 0,1 мл 0,1% раствора каждые 1-2 ч в конъюнктиву.

    Лекарственные формы: Идоксуридин глазные капли B.P.

     
    г. Тиосемикарбазоны

     

    iv. Метисазон (Марборан)


    Синтез


    Доза: Рекомендуемая пероральная доза составляет 1.5–3,0 г 2 раза в сутки в течение четырех дней. В качестве профилактического средства против оспы его следует вводить перед 8-9-й день 12-дневного инкубационного периода.

    Использование : Используется для лечения вирусной инфекции.

     

    д. Адамантанамины

     

    1. Амантадин (Симметрел)


    Синтез


    Метаболизм: Приблизительно 90% препарата выводится в неизмененном виде через в почках, главным образом за счет клубочковой фильтрации и канальцевой секреции, а также отсутствуют сообщения о продуктах метаболизма.Подкисление мочи увеличивает скорость экскреции амантадина.

    Свойства и применение: Амантадина гидрохлорид представляет собой белый кристаллический порошок, растворимый в воде и спирте. Амантадин применяют для лечения Болезнь Паркинсона. Он эффективен против вируса гриппа типа А, пара грипп и некоторые РНК-содержащие вирусы. Он также используется в качестве агониста дофаминовых рецепторов.

    Анализ: Растворить образец в смеси 0.01 М соляной кислоты и спирта (1:10) и титруют 0,1 М раствором гидроксида натрия. Определить конечную точку потенциометрически.

    Доза: Обычная рекомендуемая доза составляет 100 мг два раза в день. Для детей В возрасте 1–9 лет вводимая доза составляет 4–9 мг/кг, в возрасте 9–12 лет 100 мг два раза в день.

    Лекарственные формы: Капсулы амантадина В.П., В.П., раствор Амантадина для приема внутрь В.П.

     

    2.Римантадин


    Синтез


    Метаболизм: Римантадин метаболизируется в печени и приблизительно 20% выводится в неизменном виде в виде гидроксилированного соединения.

    Свойства и применение: Римантадин представляет собой белые или почти белые кристаллы, растворим в воде. Применяется для профилактики инфекций, вызванных различными штаммы вируса гриппа-А.

    Доза: Рекомендуемая доза обычно составляет 300 мг.

     

    Разное

    я. Рибавирин (Виразол)


    1-(3,4-Дигидрокси-5-(гидроксиметил)-тетрагидрофуран-2-ил)-1 H -1,2,4-триазол-3-карбоксамид

    Синтез


    Свойства и применение: Рибавирин представляет собой белый кристаллический порошок, растворимый в в воде, мало растворим в этаноле и хлористом метилене.Он используется в лечение гриппа типа А и В, гепатита, генитального герпеса и Ласса высокая температура.

    Анализ: Анализ проводится методом жидкостной хроматографии.

    Доза: При вирусном гепатите, гриппе и инфекциях, вызванных вирусом герпеса, рекомендуемая доза составляет до 1 г в сутки в несколько приемов.

    Лекарственные формы: Рибавирин раствор для небулайзера B.P.

     

    Противовирусная активность экстрактов экстремофильных актиномицетов из уникальных экосистем Казахстана в отношении вирусов гриппа и парамиксовирусов | Вирусологический журнал

    Культивирование и выделение штаммов актиномицетов

    Из 5 штаммов актиномицетов, пронумерованных К-192, К-340, К-362, К-522 и К-525, получено 30 препаратов.Эти препараты были ранее проверены, и было показано, что они проявляют ингибирующую биологическую активность в отношении других микробных патогенов [25]. 30 препаратов были помечены следующим образом:

    1. 1.

      K-192-CBN, K-340-CBN, K-362-CBN, K-522-CBN и K-525-CBN («CBN» – нейтральный культуральный бульон): выделены образцы штамма актиномицетов культуральным бульоном из штаммов, выращенных в нейтральных условиях роста;

    2. 2.

      K-192-CBS, K-340-CBS, K-362-CBS, K-522-CBS и K-525-CBS

      («CBS» – физиологический раствор культурального бульона): неэкстрагированные образцы культуральной жидкости штаммов актиномицетов, выращенных в солевых (экстремальных) условиях роста;

    3. 3.

      K-192-1 N, K-340-1 N, K-362-1 N, K-522-1 N и K-525-1 N: эти образцы представляют собой экстракты, приготовленные из культурального бульона штаммов актиномицетов в нейтральных условиях. роста;

    4. 4.

      К-192-1С, К-340-1С, К-362-1С, К-522-1С и К-525-1С – эти образцы представляют собой экстракты, приготовленные из культурального бульона штаммов актиномицетов в физиологическом растворе (крайняя ) условия роста;

    5. 5.

      К-192-2 Н, К-340-2 Н, К-362-2 Н, К-522-2 Н и К-525-2 Н – эти образцы представляют собой экстракты, приготовленные из штамма актиномицетов биомасса (клетки) в нейтральных условиях роста;

    6. 6.

      К-192-2С, К-340-2С, К-362-2С, К-522-2С и К-525-2С – эти образцы представляют собой экстракты, приготовленные из биомассы (клеток) штаммов актиномицетов в солевых условиях роста.

    Тестирование токсичности препаратов актиномицетов

    Токсичность 30 препаратов, описанных выше, тестировали с использованием трех различных анализов; действие препаратов на 50% лизис эритроцитов (ТС 50 среднее значение, мг/мл), действие препаратов на 50% гибель клеток куриных фибробластов (ТС 50 среднее значение, мг/мл) и влияние препаратов на 50% гибель куриных эмбрионов (ТС 50 среднее значение, мг/мл).Результаты исследования представлены в дополнительном файле 1: рисунок S1, дополнительном файле 2: рисунок S2 и дополнительном файле 3: рисунок S3. В этих анализах более низкие концентрации препаратов, вызывающие измеряемый эффект, указывали на более высокий уровень токсичности. Мы заметили, что уровень измеренной токсичности варьировался в зависимости от доз препаратов, а также анализов. Кроме того, эффекты токсичности различаются в зависимости от используемых биологических моделей (при тестировании с использованием 2% куриных эритроцитов, куриных фибробластов или 10-дневных куриных эмбрионов) для испытаний на токсичность.В целом меньшая токсичность наблюдалась при испытаниях препаратов на куриных эмбрионах, а более высокая токсичность — при испытаниях препаратов на куриных фибробластах. Штамм К-525 показал наименьшее количество пробоподготовки, необходимое для уничтожения 50% эритроцитов в нейтральных условиях, в то время как препараты CBS требовали самой высокой концентрации (TC 50 ) для разрушения 50% эритроцитов. В целом, CBS и CBN в качестве условий роста привели к более низкой токсичности препаратов, поскольку эти образцы требовали самых высоких концентраций для уничтожения 50% куриных фибробластов.Мы обнаружили, что актиномицеты, выращенные в условиях 2 N, 1 N, 1S и 2S, проявляли более высокую токсичность в отношении куриных фибробластов по сравнению с препаратами культурального бульона. Способность препаратов образцов индуцировать гибель куриных эмбрионов при тестировании показала, что состояние препарата 1 N также показало высокую токсичность для препаратов всех штаммов, кроме К-362. Как и ожидалось, препараты КОС показали относительно низкую токсичность по сравнению с другими условиями для всех выбранных препаратов.Кроме того, штамм К-340 показал наименьшую токсичность (наибольшую ТС 50 ) для препарата 1С по сравнению с препаратами 1С для других штаммов, которые проявляли сравнительно высокую токсичность. Из результатов H-теста Крускала-Уоллиса, который был проведен для каждого отдельного штамма, используемого в тестировании гемолитической активности, было показано, что не было статистически значимой разницы в токсичности между 6 различными экстрактами, поскольку все значения p были больше, чем 0,05 ( p-значение  = 0.4159) для всех проанализированных штаммов. Результаты анализа представлены в дополнительном файле 4: Таблица S1. Определяли токсическую дозу препаратов, вызывающую 50% лизис эритроцитов, куриных фибробластов и куриных эмбрионов (ТС 50 ), и использовали ее для расчета селективного индекса (СИ), представленного в таблице 2 (СИ определяли по соотношению средняя концентрация токсического вещества (TC 50 ) к средней эффективной концентрации, ингибирующей вирус (EC 50 )).

    Таблица 2 Специфическое противовирусное действие (SI-индекс) препаратов, полученных из экстремофильных актиномицетов, в отношении орто- и парамиксовирусов.SI определяли по отношению средней концентрации токсического вещества (ТС 50 ) к средней эффективной вирусингибирующей концентрации (ЕС 50 ). SI-индекс больше или равный 10 свидетельствует о хорошем противовирусном действии экстрактов актиномицетов, которые специфически убивают вирус. Экстракты актиномицетов К-340-2С, К-362-2 Н, К-362-1С, К-362-2С показали высокую вирусингибирующую активность в отношении всех исследованных штаммов вируса гриппа. Только экстракты К-192-1С и К-192-2С показали хороший ИС против штамма вируса PMV-1/Beadette.Для штамма К-525 экстракт биомассы, выращенной в солевых условиях, К-525-2С имел более высокие индексы SI в отношении тестируемых вирусных штаммов, чем экстракты из культуральной жидкости или экстракты биомассы, выращенные в нейтральных условиях. В целом экстракты биомассы, выращенной в солевых условиях, обладали лучшим специфическим противовирусным действием, чем экстракты, выращенные из культуральной жидкости в нейтральных условиях

    Влияние препаратов актиномицетов на гемагглютинирующую активность отдельных вирусов гриппа и парамиксовирусов экстрактов биомассы актиномицетов, экстрактов культуральных бульонов и бесклеточных питательных сред) на гемагглютинирующую активность ортомиксовирусов (штаммы вирусов гриппа H7N1, H5N3, h2N1, h4N2) и парамиксовирусов (NDV, вирус Сендай).Рассчитывали влияние препаратов на гемагглютинирующую активность тест-вирусов, определяя эффективную ингибирующую концентрацию препарата (ЕИК

    50 , мг/мл), подавляющую 50% активности гемагглютинации вирусов.

    Установлено, что большинство экстремофильных препаратов актиномицетов не ингибируют гемагглютинирующую активность большинства исследованных вирусов гриппа (штаммы H7N1, h4N2 и H5N3) и парамиксовирусов. Однако, как показано на рис. 1а и рис. 1, было обнаружено, что несколько препаратов ингибируют гемагглютинирующую активность вируса гриппа h2N1.

    Рис. 1

    а Влияние препаратов на ингибирование гемагглютинации (HI среднее, мг/мл) вируса гриппа h2N1. Исследуемые образцы смешивали с равным объемом вирусов с титром гемагглютинации 1:256. После 30 мин инкубации при 37 °С активность гемагглютинации определяли по стандартной методике [2, 4]. Ингибиторную активность гемагглютинации рассчитывали путем сравнения титров гемагглютинации в контрольной и опытной пробах. b Эффективная ингибирующая концентрация (ЭИК50, мг/мл) шести препаратов против вируса гриппа h2N1

    Количественное измерение специфического ингибирования активности гемагглютинации в вирусе гриппа h2N1 препаратами из 5 выбранных штаммов актиномицетов указано средним значением и стандартным отклонением меры торможения гемагглютинации (HI) вируса h2N1 (рис.1а). Таким образом, более низкое значение HI свидетельствует о большей эффективности препарата для ингибирования агглютинирующей активности исследуемого вируса. Препараты КОС большинства штаммов требовали наиболее высоких концентраций для HI 50 (следовательно, менее эффективны), в то время как препараты 2S из штаммов К-192, К-340 и К-362 и препарат 2 Н из штаммов К-362 и К-525 требуется наименьшая концентрация по сравнению с другими препаратами (и, следовательно, более эффективная), чтобы вызвать ингибирование активности гемагглютинации h2N1.Препараты культурального бульона КБН и КБС из штаммов К-192 и К-362 сходны по способности индуцировать ГИ, в то время как КБН из К-340, К-522 и К-525 проявляли более эффективное ингибирующее действие на активность гемагглютинации. Сравнивая экстракты, приготовленные из культуральных жидкостей штаммов, выращенных в нейтральной среде (1 Н), по сравнению со штаммами, выращенными в солевых условиях (1С), препараты 1С более эффективны, чем 1 Н, для штаммов К-192, К-362 и К-525. . Для препаратов биомассы из штаммов, выращенных в нейтральном (2 Н) и солевом (2С) условиях, более эффективны препараты 2С 2 Н для штаммов К-192, К-340 и К-522.

    На рис. 1б обобщены 6 отобранных препаратов из штаммов К-192, К-340, К-362 и К-525, выращенных в нейтральных или солевых условиях, которые эффективно подавляли 50% активности гемагглютинации вируса гриппа h2N1. K-525-2S показал самую низкую эффективную ингибирующую концентрацию и, следовательно, является наиболее эффективным препаратом, особенно при 0,008 мг/мл, по сравнению с другими 5 выбранными препаратами, которые ингибировали 50% гемагглютинирующей активности вируса гриппа h2N1.

    Влияние препаратов актиномицетов на нейраминидазную активность отдельных вирусов гриппа и парамиксовирусов

    Влияние испытуемых препаратов (экстракты экстремофильных актиномицетов, бесклеточная культуральная жидкость) на нейраминидазную активность вирусов гриппа А с различными типами нейраминидаз (N1, N2 , N3), в том числе штаммы, относящиеся к эпидемически значимым штаммам и штаммам, устойчивым к коммерческим противовирусным препаратам.Способность тестируемых препаратов ингибировать нейраминидазную активность вирусов гриппа оценивали как эффективную концентрацию тестируемых препаратов (ЕИК 50 , мг/мл), способную ингибировать 50% нейраминидазной активности (NI 50 ).

    Показано, что 3 экстракта экстремофильных актиномицетов: К-192-1 Н, К-192-2 Н и К-192-2С способны ингибировать нейраминидазную активность всех протестированных штаммов вируса гриппа А (рис. 2а). -г). Кроме того, экстракты актиномицетов К-362-2 N, К-525-2 N и К-525-2S ингибировали нейраминидазную активность эпидемически значимого штамма вируса гриппа подтипа h4N2 (рис.3).

    Рис. 2

    a d Влияние препаратов на ингибирование нейраминидазы (NI50, среднее мг/мл) штаммов вируса гриппа h4N2 ( a ), h2N1 ( b ), c ) и H7N1 ( d ). Тестируемые вирусы разводили в ферментном буфере и в лунки добавляли аликвоты по 25 мкл каждого разведения. В качестве положительного контроля использовали ферментный буфер вместо вируссодержащего материала. После инкубации в течение 30 мин при 37°С в каждую лунку добавляли аликвоту по 50 мкл раствора субстрата и инкубировали планшет при комнатной температуре в течение 30 мин.В лунки вносили аликвоты по 150 мкл стоп-буфера и измеряли оптическую плотность на спектрофотометре «Текан». Способность испытуемых препаратов ингибировать нейраминидазную активность вирусов гриппа оценивали как эффективную концентрацию испытуемых препаратов (КИП 50 , мг/мл), способную ингибировать 50% нейраминидазной активности (НИ 50 )

    Рис. 3

    Концентрация эффективного ингибирования (ЭИК50, мг/мл) препаратов против вируса гриппа типа А.Экстракты актиномицетов, К-192-1 Н, К-192-2 Н, К-192-2С, К-362-1С, К-362-2 Н, К-525-2 Н, К-525-2С ингибируют нейраминидазу активность h4N2, h2N1, H5N3 и H7N1. Экстракт актиномицетов К-362-1S подавлял нейраминидазную активность штаммов вируса гриппа, устойчивых к коммерческим противовирусным препаратам (A/Vladivostok/2/09, h2N1 и A/tern/Южная Африка/1/61, H5N3)

    Количественное измерение специфического ингибирования активности нейраминидазы в вирусе гриппа h4N2 в 5 выбранных штаммах актиномицетов показано средним значением и мерой стандартного отклонения ингибирования нейраминидазы (NI) вируса h4N2.Как показано на рис. 2а, мы наблюдали, что 5 отобранных штаммов, выращенных в определенных нейтральных или солевых условиях, эффективно ингибировали 50% нейраминидазной активности вируса гриппа h4N2. Штаммы К-192 и К-362, выращенные в условиях 2 N, 1S и 2S, требовали более низких концентраций препаратов (и, следовательно, более активных) для ингибирования нейраминидазной активности h4N2 по сравнению с условиями роста 1 N, CBN и CBS ( Рис. 2а). Среди всех 5 штаммов состояние 2 N требовало относительно наименьшего количества экстракта для ингибирования активности нейраминидазы, следовательно, это наиболее активный препарат против вируса h4N2 (рис.2а). С другой стороны, CBS как условие является одним из наименее эффективных в ингибировании активности нейраминидазы для всех 5 штаммов. Интересно, что препарат 2S требовал небольших количеств экстракта во всех штаммах, кроме К-525, где он показал самую высокую используемую концентрацию и, таким образом, был наименее активным (рис. 2а).

    Наименьшие концентрации, необходимые для инактивации нейраминидазной активности h2N1, были в 6 препаратах из штамма К-525 (рис. 2б). Препараты 2S и 2 N требовали меньших концентраций для всех 5 штаммов для ингибирования активности нейраминидазы по сравнению с остальными препаратами (рис.2б). В 4 препаратах CBS для всех, кроме штамма К-525, требовались почти одинаковые концентрации для ингибирования нейраминидазной активности h2N1. Также штаммы К-192 и К-362 показали относительно схожие результаты по влиянию на активность нейраминидазы при выращивании в CBN (рис. 2б). В целом можно отметить, что препараты CBN и CBS из К-192, К-340 и К-362 проявляли наименьшую активность экстрактов в отношении ингибирования нейраминидазы вируса h2N1.

    Самая высокая (и, следовательно, наименее эффективная) концентрация в штаммах K-522 и K-525, необходимая для ингибирования нейраминидазной активности H5N3, была получена из препарата CBS (рис.2с). В остальных препаратах CBS показал почти одинаковые значения NI 50 , которые были выше по сравнению с условиями 2 N и 2S, которые имели самые низкие значения NI 50 из всех 6 условий выращивания в К-192, К-340, и К-362 (рис. 2в). В целом, K-192-2S, K-340-2S, K-362-1S являются наиболее активными в ингибировании нейраминидазной активности H5N3, поскольку для этих экстрактов требуются самые низкие концентрации (рис. 2c).

    Эффект близок к наблюдаемому для H5N3 и H7N1 с небольшими различиями в значениях NI 50 для 1 N для К-525, 1S для К-192, 2 N для К-522 и 2S для К-522 (Рисунок.2г). Наиболее активными были экстракты штаммов К-340, выращенных в условиях 2S, К-362 в условиях 2 N и 1S в отношении активности нейраминидазы H7N1.

    На рис. 3 показаны EIC 50 испытанных препаратов, которые были эффективны в ингибировании нейраминидазной активности исследованных штаммов вируса гриппа. Интересно, что один экстракт (К-362-1S) ингибировал активность штаммов вируса гриппа, устойчивых к коммерческим противовирусным препаратам (A/Vladivostok/2/09, h2N1 и A/tern/Южная Африка/1/61, H5N3).

    Определена средняя эффективная концентрация испытуемых препаратов (КФ 50 , мг/мл), вызывающая 50% ингибирование инфекционной активности вируса (рис. 4а-е). Экстракты препаратов CBN и CBS продемонстрировали более низкую вирусингибирующую активность в отношении всех исследованных штаммов вируса гриппа и парамиксовирусов по сравнению с экстрактами биомассы экстремофильных актиномицетов, таких как К-362-2 N, К-192-2S, К-340- 2С и К-362-2С (рис. 4а-е). В целом было обнаружено, что препараты биомассы большинства (но не всех) штаммов, выращенных в солевых условиях (2S), наиболее эффективны в ингибировании подтипа вируса гриппа А, PMV-1/Beadette и Sendai.штамм 960, а затем препараты 1С (экстракты культуральной жидкости штаммов, выращенных в солевых (экстремальных) условиях). Результаты этих рисунков были дополнительно проанализированы для более значимой интерпретации для определения индекса SI, как описано в разделе ниже.

    Рис. 4

    а ф Средняя эффективная вирусингибирующая концентрация (КФ 50 ,мг/мл) препаратов против штаммов вируса гриппа h4N2 ( а ), 902N2 H5N3 ( c ), H7N1 ( d ) и PMV-1/Beadette ( e ), Сендай.штамм 960 ( f ). Вирусингибирующая активность препаратов, полученных из экстремофильных актиномицетов, в отношении вируса гриппа h4N2 в дозе 100 ЭИД 50 /мл. Специфическую вирусингибирующую активность исследуемых препаратов определяли в соответствии с рекомендациями «Pre-clinical Drug Research Guide» [21, 22]. Различные дозы препаратов экстрактов смешивали с равным объемом 100 ЭИД50/мл тестируемого вируса. После 30 мин инкубации при 370 С смесь инокулировали в хорион-аллантоисную полость 10-дневных куриных эмбрионов.Вирусы выращивали в течение 24–72 ч при 370С в зависимости от штамма вируса. На наличие вирусов указывала реакция гемагглютинации (ГА-тест). Способность исследуемых препаратов ингибировать инфекционную активность вируса оценивали путем сравнения результатов ГА-теста в опытных и контрольных образцах. В качестве контроля использовали забуференный физиологический раствор рН 7,2 и аллантоисную жидкость с вирусами, но без добавления препаратов, полученных из экстремофильных актиномицетов

    SI-индекс препаратов актиномицетов для определения эффективной вирусингибирующей активности

    Далее в опытах на курах эмбрионов оценивали эффективную дозу препаратов, способных ингибировать 50% репродукции тестируемых вирусов.Селективный индекс (СИ-индекс) в отношении орто- и парамиксовирусов, определяемый отношением средней концентрации токсического вещества (ТС 50 ) к средней эффективной вирусингибирующей концентрации (ЕС 50 ), рассчитывали в соответствии с методическими рекомендациями. («Руководство по доклиническим исследованиям лекарственных средств»). Результаты анализа представлены для препаратов, которые обладали выраженными противовирусными свойствами, показывая индекс SI больше или равный 10 (табл. 2).

    Установлено, что культуральный бульон актиномицетов штаммов К-192, К-340 и К-362 (имеющих индекс SI 0) не способен ингибировать репродукцию всех исследованных штаммов вирусов гриппа и парамиксовирусов.Четыре экстракта культуральной жидкости актиномицетов штаммов К-192-1 Н, К-340-2 Н, К-340-1С и К-522-1 Н также не проявляли противовирусной активности в тестируемом интервале доз (имеющих индекс SI из 0). Однако культуральный бульон штаммов актиномицетов К-525 и К-522 и экстракт актиномицетов К-522-1С, К-525-1С, К-525-1 Н, К-522-2 Н, К-340-1 Н имели хороший SI-индекс в отношении хотя бы одного из протестированных вирусов (табл. 2).

    Таким образом, экстракт биомассы экстремофильных актиномицетов штамма К-362, выращенных в нейтральных условиях культивирования (К-362-2 N), продемонстрировал высокую вирусингибирующую активность в отношении всех исследованных штаммов вируса гриппа (табл. 2).Также установлено, что 3 экстракта биомассы экстремофильных актиномицетов, штаммов К-192, К-340 и К-362, выращенных в присутствии повышенной концентрации солей (экстракты К-192-2С, К-340-2С, К -362-2S) обладал высокой противовирусной активностью в отношении всех исследованных штаммов вируса гриппа, включая лекарственно-устойчивые штаммы (табл. 2).

    Значение SI выше 10 считается хорошим селективным показателем, который может дать представление об избирательности препаратов актиномицетов в отношении избирательного уничтожения вируса, а не хозяина.В целом специфическое противовирусное действие К-340-2S, К-362-2 N, К-362-1S и К-362-2S показало, что индекс SI более 10 против всех исследованных штаммов вирусов гриппа типа А. . Кроме того, как K-362-1S, так и K-362-2S имели самый высокий SI со значением 40 по сравнению с h4N2, h2N1 и H5N3. Только экстракты K-192-1S и K-192-2S имели хороший результат противовирусной специфичности против PMV-1/Beadette, SI 10, тогда как эффективный SI против Sendai, штамм 960, был обнаружен у K-192-1S, K-340. -1 Н, К-362-2С, К-522-КНБ, К-522-1С, К-525-КНБ, К-525-2 Н, К-525-1С и К-525-2С.

    Сравнение препаратов актиномицетов с коммерческими противовирусными препаратами и растительными препаратами

    Установлено, что вирусингибирующая активность экстрактов экстремофильных актиномицетов К-192-2С, К-340-2С, К-362-2С, К-362-2 N, и К-362-1S сравнима с противовирусной активностью коммерческих противогриппозных препаратов Тамифлю и Римантадин и растительных противовирусных препаратов Вироспан и Флавовир (рис. 5 и 6).

    Рис. 5

    Концентрация эффективного ингибирования (EIC50, мг/мл) препаратов против H7N1, H5N3, h2N1, h4N2 в сравнении с 2 коммерчески доступными противовирусными препаратами, Римантадином и Тамифлю.Также ингибирование вирусной активности исследуемыми экстрактами было сравнимо с растительными противовирусными препаратами Вироспан и Флавовир

    . Рис. 6

    Специфическое противовирусное действие (СИ) испытуемых препаратов на вирусы гриппа. Коммерчески доступные препараты Вироспан и Флавовир показали самые высокие значения SI в отношении всех исследованных вирусов гриппа. Однако экстракты К-192-2S, К-340-2S, К-362-2 N, К-362-1S имели более высокий СИ, чем Тамифлю и Римантадин, в отношении вирусных штаммов h4N2, h2N1, H5N3 и H7N1

    Препараты актиномицетов требуются более низкие концентрации для эффективного уничтожения 50% вирусов по сравнению с двумя коммерчески доступными противовирусными препаратами, римантадином и тамифлю.

    Значения SI были самыми высокими для препаратов растительного происхождения Вироспан и Флавовир против всех исследованных модельных вирусов гриппа А. Однако препараты актиномицетов, а именно К-192-2S, К-340-2S, К-362-2 N и К-362-1S, имели более высокий СИ, чем коммерчески доступные препараты Тамифлю и Римантадин в отношении h4N2, h2N1, H5N3.

    Добавить комментарий

    Ваш адрес email не будет опубликован.

    2022 © Все права защищены.